Terreni per biologia molecolare
Modified Terrific Broth
Terreno da usare con il glicerolo nella coltura dei ceppi ricombinanti di E. coli.
- Codice
- LC-1548
- Categoria
- Terreni per biologia molecolare
- Formato
- 500 g
- Conservazione
- da 2 a 25 °C
- Validità minima garantita
- 15 mesi
Modified Terrific Broth è un terreno che sostiene un'elevata densità cellulare e, quando è formulato per la crescita ottimale di E. coli, mantiene a lungo la crescita in fase logaritmica. Di conseguenza, produce una quantità maggiore di proteine ricombinanti e di DNA plasmidico. In alcune circostanze sostituisce LB Broth (Lennox) (LC-1231), usato negli studi genetici.
Caratteristiche principali
Applicazioni
Preparazione e recupero di cellule competenti di Escherichia coli.
Settori
Terreni di coltura per biologia molecolare.
Preparazione
47,6 g in 900 mL di acqua distillata; aggiungere 4 mL di glicerolo e portare a 1000 mL, far bollire per un minuto, sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.
Principio e uso
Il triptone fornisce azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. L'estratto di lievito è fonte di vitamine, in particolare del gruppo B. I fosfati di potassio agiscono da sistema tampone per prevenire la morte cellulare.
Il glicerolo è la fonte di carboidrati e di carbonio, perché non viene fermentato ad acido acetico come il glucosio e non porta a risultati confusi.
La formulazione di questo terreno è stata modificata a partire da Terrific Broth (LC-1246), con una diversa concentrazione del tampone biologico.
Specifiche tecniche
| Solubilità | Senza residui |
|---|---|
| Aspetto | Polvere fine |
| Colore del terreno disidratato | Beige |
| Colore del terreno preparato | Ambra |
| pH finale (25 °C) | 7,2 ± 0,2 |
| Quantità | 47,6 g in 900 mL |
| Conservazione | da 2 a 25 °C |
Formula
| Componente | g/L |
|---|---|
| Fosfato dipotassico | 9,4 |
| Fosfato monopotassico | 2,2 |
| Triptone | 12 |
| Estratto di lievito | 24 |
Preparazione e uso
Preparazione
Sospendere 47,6 grammi di terreno in 900 mL di acqua distillata. Mescolare bene. Aggiungere 4 mL di glicerolo, portare a un volume finale di 1000 mL e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Distribuire in contenitori adatti e sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.
Istruzioni per l'uso
- Eseguire la procedura sperimentale secondo l'uso o lo scopo appropriato.
- Inoculare e incubare a una temperatura di 35 ± 2 °C per 18-24 ore.
Controllo qualità
Prova microbiologica
Condizioni di incubazione: 35 ± 2 °C / 18-24 h.
| Microrganismo | Specifica |
|---|---|
| Escherichia coliATCC 23724 | Crescita buona |
| Escherichia coliATCC 33694 | Crescita buona |
| Escherichia coliATCC 33849 | Crescita buona |
| Escherichia coliATCC 39403 | Crescita buona |
| Escherichia coliATCC 47014 | Crescita buona |
Bibliografia
- SAMBROC, J., E.F. FRITSCH, T. MANIATIS (1989) MOLECULAR CLONING.
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