Terreni per biologia molecolare
Terrific Broth
Terreno usato con glicerolo per la coltivazione dei ceppi ricombinanti di E. coli.
- Codice
- LC-1246
- Categoria
- Terreni per biologia molecolare
- Formato
- 500 g
- Conservazione
- da 2 a 25 °C
- Validità minima garantita
- 15 mesi
Terrific Broth è un terreno che sostiene un'alta densità cellulare e, poiché è formulato per la crescita ottimale di E. coli, mantiene a lungo la crescita in fase logaritmica. Di conseguenza produce una quantità maggiore di proteine ricombinanti e di DNA plasmidico. In alcune circostanze sostituisce LB Broth (Lennox) (LC-1231), usato negli studi genetici.
Caratteristiche principali
Applicazioni
Preparazione e recupero di cellule competenti di Escherichia coli.
Settori
Terreni di coltura per biologia molecolare.
Preparazione
50,8 g in 900 mL di acqua distillata, aggiungere 4 mL di glicerolo e portare a 1000 mL; far bollire per un minuto, sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.
Principio e uso
Il triptone fornisce azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. L'estratto di lievito è la fonte di vitamine, in particolare del gruppo B. I fosfati di potassio agiscono come sistema tampone per evitare la morte cellulare.
La fonte di carboidrati e di carbonio è il glicerolo, che non viene fermentato ad acido acetico come il glucosio e non porta a risultati confusi.
Specifiche tecniche
| Solubilità | Senza residui |
|---|---|
| Aspetto | Polvere fine |
| Colore del terreno disidratato | Beige |
| Colore del terreno preparato | Ambra |
| pH finale (25 °C) | 7,2 ± 0,2 |
| Quantità per litro | 50,8 g |
| Conservazione | da 2 a 25 °C |
Formula
| Componente | g/L |
|---|---|
| Fosfato dipotassico | 12,54 |
| Fosfato monopotassico | 2,31 |
| Triptone | 12 |
| Estratto di lievito | 24 |
Preparazione e uso
Preparazione
Sospendere 50,8 grammi di terreno in 900 mL di acqua distillata. Mescolare bene e aggiungere 4 mL di glicerolo. Portare a un volume finale di 1000 mL e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Distribuire in contenitori adatti e sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.
Istruzioni per l'uso
- Eseguire la procedura sperimentale secondo l'uso o lo scopo appropriato.
- Inoculare e incubare a una temperatura di 35 ± 2 °C per 18-24 ore.
Controllo qualità
Prova microbiologica
Condizioni di incubazione: 35 ± 2 °C / 18-24 h.
| Microrganismo | Specifica |
|---|---|
| Escherichia coliATCC 23724 | Crescita buona |
| Escherichia coliATCC 33694 | Crescita buona |
| Escherichia coliATCC 33849 | Crescita buona |
| Escherichia coliATCC 39403 | Crescita buona |
| Escherichia coliATCC 47014 | Crescita buona |
Bibliografia
- Joseph Sambrook, David W. Russell. The condensed protocols from molecular cloning: a laboratory manual.
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