Luria Agar (Miller’s Modification)

Questi ceppi derivano in genere da E. coli K12 e non sono in grado di produrre la vitamina B; per questo il terreno è formulato per favorire la crescita dei microrganismi esigenti dal punto di vista nutrizionale. Questo ceppo di E. coli è stato ulteriormente modificato con una mutazione specifica, per creare un ceppo auxotrofo che non è in grado di crescere su terreni nutrizionalmente carenti. Alcuni vettori plasmidici si replicano in un numero elevato di copie e non richiedono un'amplificazione selettiva. Alcuni vettori non si replicano così liberamente e devono essere amplificati in modo selettivo. Si possono aggiungere antibiotici per inibire la sintesi dell'ospite e, di conseguenza, impedire la replicazione del cromosoma batterico.

Il triptone fornisce azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. L'estratto di lievito è la fonte di vitamine, in particolare del gruppo B. Il cloruro di sodio fornisce gli elettroliti essenziali per il trasporto e l'equilibrio osmotico. L'agar batteriologico è l'agente solidificante.

Luria Agar (Miller’s Modification) ha un contenuto di cloruro di sodio diverso da quello di altri terreni come LB Agar (Lennox) (LC-1083) o Luria Agar (Miller’s LB Agar) (LC-1552). Questo permette di scegliere la concentrazione di sale ottimale del terreno per un ceppo specifico.

Preparazione

Sospendere 30,5 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti. Raffreddare a 45-50 °C, mescolare bene e distribuire in piastre.

Istruzioni per l'uso

1. Eseguire la procedura sperimentale secondo l'uso o lo scopo appropriato.
2. Inoculare e incubare a una temperatura di 35 ± 2 °C per 18-24 ore.

• Miller J. H.: Experiments in Molecular Genetics, Cold Spring Harbor Laboratory (1972).