Terreni per biologia molecolare
2xYT Medium
Per la coltivazione dei ceppi ricombinanti di E. coli e per la crescita dei batteriofagi filamentosi.
- Codice
- LC-1507
- Categoria
- Terreni per biologia molecolare
- Formato
- 500 g
- Conservazione
- da 2 a 25 °C
- Validità minima garantita
- 15 mesi
2xYT Medium è un terreno nutritivo ottimizzato per la crescita e il mantenimento dei fagi M13 e di altri batteriofagi filamentosi. È adatto anche alla crescita dei ceppi ricombinanti di E. coli.
Caratteristiche principali
Applicazioni
Preparazione e recupero di cellule competenti e arricchimento selettivo di Escherichia coli.
Settori
Terreni di coltura per biologia molecolare.
Preparazione
31 g in un litro di acqua distillata; far bollire per un minuto, sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.
Principio e uso
Il triptone fornisce azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. L'estratto di lievito è fonte di vitamine, in particolare del gruppo B. Il cloruro di sodio fornisce gli elettroliti essenziali per il trasporto e l'equilibrio osmotico. I componenti di 2xYT Medium comprendono azoto e altri fattori di crescita che permettono ai batteriofagi di riprodursi in grandi quantità senza indebolire l'ospite. E. coli cresce più velocemente in questo terreno arricchito, perché contiene aminoacidi, precursori dei nucleotidi, vitamine e altri metaboliti che altrimenti la cellula dovrebbe sintetizzare da sola.
Specifiche tecniche
| Solubilità | Senza residui |
|---|---|
| Aspetto | Polvere fine |
| Colore del terreno disidratato | Beige |
| Colore del terreno preparato | Ambra, leggermente opalescente |
| pH finale (25 °C) | 7,0 ± 0,2 |
| Quantità per litro | 31 g |
| Conservazione | da 2 a 25 °C |
Formula
| Componente | g/L |
|---|---|
| Cloruro di sodio | 5 |
| Triptone | 16 |
| Estratto di lievito | 10 |
Formula tipica in g/L, adattata e/o integrata secondo necessità per soddisfare i criteri di prestazione.
Preparazione e uso
Preparazione
Sospendere 31 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Distribuire in contenitori adatti e sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.
Istruzioni per l'uso
- Eseguire la procedura sperimentale secondo l'uso o lo scopo appropriato.
- Inoculare e incubare a una temperatura di 35 ± 2 °C per 18-24 ore.
Controllo qualità
Prova microbiologica
Condizioni di incubazione: 35 ± 2 °C / 18-24 h.
| Microrganismo | Specifica |
|---|---|
| Escherichia coliATCC 23724 | Crescita buona |
| Escherichia coliATCC 33694 | Crescita buona |
| Escherichia coliATCC 33849 | Crescita buona |
| Escherichia coliATCC 39403 | Crescita buona |
| Escherichia coliATCC 47014 | Crescita buona |
Bibliografia
- Principles of Virology: Molecular Biology, Pathogenesis and Control of Animal Viruses. J.S. Flint, L.W. Enquist, V. Racaniello and A.M. Shalka. 2004. 2nd ed. ASM Press, Washington, D.C.
- Joseph Sambrook, David W. Russell. The condensed protocols from molecular cloning: a laboratory manual.
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