YP Agar Base Medium

YP Agar Base Medium si usa anche per coltivare Saccharomyces cerevisiae e altri lieviti. I lieviti crescono bene su un terreno che contiene solo una quantità minima di glucosio e sali. Questo terreno contiene glucosio (con l'aggiunta di destrosio dopo la sterilizzazione in autoclave), sali e proteine, il che favorisce la crescita di Saccharomyces cerevisiae e riduce i tempi di crescita. L'estratto di lievito è la fonte di vitamine, in particolare del gruppo B, essenziali per la crescita batterica. Il peptone fornisce azoto, vitamine, minerali e aminoacidi. L'agar batteriologico è l'agente solidificante.

Saccharomyces cerevisiae ha un genoma di 14 Mb che contiene 6000 geni disposti in 16 cromosomi, completamente sequenziati, ed è quindi una specie tipo negli studi di microbiologia e di genetica.

Preparazione

Sospendere 50 grammi di terreno disidratato in 900 mL di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti. Raffreddare a temperatura ambiente e aggiungere in asepsi 100 mL di destrosio sterile al 20 %. Mescolare bene e distribuire in contenitori adatti.

Istruzioni per l'uso

Metodo per inclusione:

1. Depositare 1 mL della sospensione iniziale e/o del campione diluito in una piastra di Petri vuota.
2. Aggiungere in ogni piastra di Petri 12-15 mL di agar raffreddato a 44-47 °C e mescolare delicatamente muovendo la piastra.
3. Lasciar solidificare le piastre e incubarle capovolte a una temperatura di 25 ± 2 °C per 42-48 ore.

Metodo per striscio:

1. In una piastra di Petri, aggiungere 12-15 mL di agar fuso e lasciar solidificare.
2. Inoculare 10 µL della sospensione iniziale e/o del campione diluito.
3. Distribuire l'inoculo sulla superficie dell'agar con un'ansa sterile.
4. Incubare le piastre capovolte a una temperatura di 25 ± 2 °C per 42-48 ore.

• Guide to yeast genetics and molecular biology. (1991) Ed. Christine Guthrie & Gerald Fink. Methods in Enzymology vol. 194.
• Current protocols in Molecular Biology. Eds. Ausubel, F. M. Brent, R., Kingston, R, E., Moore, D. D., Seidman, J. G., Smith J. A., and Struhl, K. 13,01.-13.2.10.
• The Yeast Genome Directory (1997, May 29) Nature Supp. to volume 387.
• The condensed protocols from molecular cloning: a laboratory manual / Joseph Sambrook, David W. Russell.