Terreni per biologia molecolare
RM Base Medium
Terreno solido per il mantenimento e la propagazione del promotore PL nei ceppi di E. coli GI724, GI826 e GI698.
- Codice
- LC-1538
- Categoria
- Terreni per biologia molecolare
- Formato
- 500 g
- Conservazione
- da 2 a 25 °C
- Validità minima garantita
- 15 mesi
RM Base Medium si usa per il mantenimento e la propagazione del promotore PL nei ceppi di E. coli GI724, GI826 e GI698 e per aumentare la resa di plasmide per il sequenziamento dei cloni positivi. Questi ceppi hanno il gene del repressore cI di lambda sotto il controllo del promotore inducibile dal triptofano, trp. Questo terreno ha bassi livelli di triptofano.
Caratteristiche principali
Applicazioni
Preparazione e recupero di cellule competenti di Escherichia coli.
Settori
Terreni di coltura per biologia molecolare.
Preparazione
30,6 g in 900 mL di acqua distillata; aggiungere 20 mL di glicerolo al 50 %, sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti, aggiungere l'ampicillina.
Principio e uso
I casaminoacidi forniscono i nutrienti e i cofattori necessari per un'eccellente crescita dei ceppi ricombinanti di E. coli. Grazie al loro maggiore grado di digestione, i casaminoacidi sono un'eccellente fonte di aminoacidi liberi. I fosfati agiscono da sistema tampone. Il cloruro di ammonio e il solfato di magnesio forniscono ioni essenziali. Il cloruro di sodio fornisce gli elettroliti essenziali per il trasporto e l'equilibrio osmotico. Per favorire la crescita può essere necessaria l'aggiunta di glucosio.
Specifiche tecniche
| Solubilità | Senza residui |
|---|---|
| Aspetto | Polvere fine |
| Colore del terreno disidratato | Beige |
| Colore del terreno preparato | Ambra |
| pH finale (25 °C) | 7,0 ± 0,2 |
| Quantità | 30,6 g in 900 mL |
| Conservazione | da 2 a 25 °C |
Formula
| Componente | g/L |
|---|---|
| Cloruro di ammonio | 1 |
| Casaminoacidi | 20 |
| Fosfato disodico | 6 |
| Citrato di magnesio | 0,095 |
| Cloruro di sodio | 0,5 |
| Fosfato monosodico | 3 |
Formula tipica in g/L, adattata e/o integrata secondo necessità per soddisfare i criteri di prestazione.
Preparazione e uso
Preparazione
Sospendere 30,6 grammi di terreno disidratato in 900 mL di acqua distillata, aggiungere 20 mL di glicerolo al 50 % e portare a un volume finale di 1000 mL. Mescolare bene. Scaldare agitando spesso fino a completa dissoluzione. Distribuire in contenitori adatti e sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti. Aggiungere in condizioni sterili 1 mL per litro di ampicillina a 100 µg/mL e mescolare bene.
Istruzioni per l'uso
Inoculare e incubare a una temperatura di 35 ± 2 °C per 18-24 ore.
Controllo qualità
Prova microbiologica
Condizioni di incubazione: 35 ± 2 °C / 18-24 h.
| Microrganismo | Specifica |
|---|---|
| Escherichia coliATCC 23724 | Crescita buona |
| Escherichia coliATCC 33694 | Crescita buona |
| Escherichia coliATCC 33849 | Crescita buona |
| Escherichia coliATCC 39403 | Crescita buona |
| Escherichia coliATCC 47014 | Crescita buona |
Bibliografia
- La Vallie, E, R. et al. (1992) Bio/Technology 11: 187-193.
- Mieschendahl, M. et al. (1996) Bio/Technology 4: 802-808.
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