2xYT Agar

I batteriofagi sono virus che possono infettare i batteri e replicarsi solo al loro interno. In molti casi si tratta di relazioni molto specifiche. I colifagi somatici infettano in modo specifico Escherichia coli e, nelle acque, indicano una contaminazione da feci umane o animali o da acque reflue che contengono tali materiali.

Il triptone e l'estratto di lievito sono le fonti di carbonio, azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita, oltre che di fattori di crescita che permettono ai fagi di riprodursi senza indebolire le cellule ospiti. Il cloruro di sodio fornisce gli elettroliti essenziali per il trasporto e l'equilibrio osmotico. Molti supplementi, compresi gli antibiotici, sono termosensibili e non si possono sterilizzare in autoclave. Vanno sterilizzati per filtrazione e aggiunti al terreno dopo che si è raffreddato e prima che solidifichi. Escherichia coli cresce più rapidamente sul terreno di arricchimento perché questo fornisce aminoacidi, precursori dei nucleotidi, vitamine e altri metaboliti che altrimenti dovrebbero essere sintetizzati dalla cellula.

Preparazione

Sospendere 46 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti. Raffreddare a 45-50 °C, mescolare bene e distribuire in piastre.

Istruzioni per l'uso

Inoculare e incubare a una temperatura di 35 ± 2 °C per 18-24 ore.

• Principles of Virology: Molecular Biology, Pathogenesis and Control of Animal Viruses. J.S. Flint, L.W. Enquist, V. Racaniello and A.M. Shalka. 2004. 2nd ed. ASM Press, Washington, D.C.
• Principles of Virology: Molecular Biology, Pathogenesis and Control. J.S. Flint, L.W. Enquist, R.M. Krug, V. Racaniello and A.M. Shalka. 2000. 1st ed. Blackwell Science Ltd.
• Flint, et al. (2003) In Principles of Virology: Molecular Biology, Pathogenesis, and Control of Animal Viruses. 2nd ed. ASM Press, Washington DC.
• Sambrook and Russell (2006) In The condensed protocols from Molecular cloning: a laboratory manual, 1st ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY.