Terreni per biologia molecolare
sLB Broth (Buffered)
Terreno studiato per aumentare la crescita batterica e ottenere rese elevate di plasmidi a basso numero di copie e rese molto elevate di plasmidi ad alto numero di copie.
- Codice
- LC-1199
- Categoria
- Terreni per biologia molecolare
- Formato
- 500 g
- Conservazione
- da 2 a 25 °C
- Validità minima garantita
- 15 mesi
sLB Broth (Buffered) è stato formulato per aumentare in modo significativo la densità cellulare rispetto al tradizionale LB Broth. Nel terreno LB Broth standard, le cellule di E. coli raggiungono bruscamente la fase stazionaria quando hanno consumato i nutrienti contenuti nel terreno. La moltiplicazione cellulare si arresta, alcune cellule muoiono e i plasmidi vanno persi.
Caratteristiche principali
Applicazioni
Preparazione e recupero di cellule competenti di Escherichia coli.
Settori
Terreni di coltura per biologia molecolare.
Preparazione
54,48 g in un litro di acqua distillata; far bollire per un minuto, sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.
Principio e uso
Sulla base dei risultati di ricerche approfondite è stata sviluppata una nuova formulazione con una miscela proprietaria di peptoni, estratto di lievito e sali, che permette alle cellule ricombinanti di E. coli una crescita maggiore. Alla fine della fase logaritmica la replicazione continua e si ottengono così rese più elevate di DNA plasmidico.
Le colture in sLB Broth hanno mostrato stabilità cellulare fino a 3 giorni senza morte cellulare: è quindi un terreno più pratico, che elimina la necessità di un'attenzione costante. Dopo 3 giorni a 37 °C la crescita di E. coli è maggiore in sLB Broth e in sLB Broth (Buffered) che nel terreno LB standard.
La miscela speciale di peptoni, l'estratto di lievito, l'agar e i sali forniscono fattori di crescita essenziali come azoto, carbonio, zolfo, minerali e vitamine, in particolare del gruppo B. Il cloruro di sodio fornisce elettroliti essenziali: ioni sodio per il trasporto e l'equilibrio osmotico.
Specifiche tecniche
| Solubilità | Senza residui |
|---|---|
| Aspetto | Polvere fine |
| Colore del terreno disidratato | Beige |
| Colore del terreno preparato | Ambra, leggermente opalescente |
| pH finale (25 °C) | 7,0 ± 0,2 |
| Quantità per litro | 54,48 g |
| Conservazione | da 2 a 25 °C |
Formula
| Componente | g/L |
|---|---|
| Estratto di lievito, miscela speciale di peptoni, sali | 54,48 |
Preparazione e uso
Preparazione
Sospendere 54,48 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Distribuire in provette e sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.
Istruzioni per l'uso
- Eseguire la procedura sperimentale secondo l'uso o lo scopo appropriato.
- Inoculare e incubare a una temperatura di 35 ± 2 °C per 24, 48 e 72 ore.
Controllo qualità
Prova microbiologica
Condizioni di incubazione: 35 ± 2 °C / 24, 48, 72 h.
| Microrganismo | Specifica |
|---|---|
| Escherichia coli DH5 alpha + pUC19 | Crescita buona |
Bibliografia
- Ausubel, Brent, Kingston, Moore, Seidman, Smith and Struhl (ed.). 1994. Current protocols in molecular biology, vol. 1. Greene Publishing Associates, Inc., Brooklyn, N.Y.
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