Terreni per biologia molecolare
LB Agar (Lennox)
Terreno raccomandato per il mantenimento e la coltivazione dei ceppi ricombinanti di E. coli.
- Codice
- LC-1083
- Categoria
- Terreni per biologia molecolare
- Formato
- 500 g
- Conservazione
- da 2 a 25 °C
- Validità minima garantita
- 15 mesi
LB Agar (Lennox) è un terreno nutrizionalmente ricco, sviluppato da Lennox per la crescita e il mantenimento di colture pure di ceppi ricombinanti di E. coli usati nelle procedure di microbiologia molecolare.
Caratteristiche principali
Preparazione e recupero di cellule competenti di Escherichia coli.
Terreni di coltura per biologia molecolare.
35 g in un litro di acqua distillata; far bollire per un minuto, sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.
Principio e uso
Questi ceppi derivano in genere da E. coli K12, che non sono in grado di produrre la vitamina B, perciò questo terreno è formulato per favorire la crescita dei microrganismi con esigenze nutrizionali elevate. Questo ceppo di E. coli è stato ulteriormente modificato con una mutazione specifica, per creare un ceppo auxotrofo che non è in grado di crescere su terreni nutrizionalmente carenti.
Il triptone fornisce azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. L'estratto di lievito è la fonte di vitamine, in particolare del gruppo B. Il cloruro di sodio fornisce gli elettroliti essenziali per il trasporto e l'equilibrio osmotico. L'agar batteriologico è l'agente solidificante. Se si desidera, si possono aggiungere anche antibiotici.
LB Agar (Lennox) ha un contenuto di cloruro di sodio diverso da quello di altri terreni come Luria Agar (Miller’s LB Agar) (LC-1552) o Luria Agar (Miller’s Modification) (LC-1308). Questo permette di scegliere la concentrazione di sale ottimale del terreno per un ceppo specifico.
Specifiche tecniche
| Solubilità | Senza residui |
|---|---|
| Aspetto | Polvere fine |
| Colore del terreno disidratato | Beige |
| Colore del terreno preparato | Ambra, leggermente opalescente |
| pH finale (25 °C) | 7,0 ± 0,2 |
| Quantità per litro | 35 g |
| Conservazione | da 2 a 25 °C |
Formula
| Componente | g/L |
|---|---|
| Agar batteriologico | 15 |
| Cloruro di sodio | 5 |
| Triptone | 10 |
| Estratto di lievito | 5 |
Preparazione e uso
Preparazione
Sospendere 35 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti. Raffreddare a 45-50 °C, mescolare bene e distribuire in piastre.
Istruzioni per l'uso
- Eseguire la procedura sperimentale secondo l'uso o lo scopo appropriato.
- Inoculare e incubare a una temperatura di 35 ± 2 °C per 18-24 ore.
Controllo qualità
Condizioni di incubazione: 35 ± 2 °C / 18-24 h.
| Microrganismo | Specifica |
|---|---|
| Escherichia coliATCC 23724 | Crescita buona |
| Escherichia coliATCC 33694 | Crescita buona |
| Escherichia coliATCC 33849 | Crescita buona |
| Escherichia coliATCC 39403 | Crescita buona |
| Escherichia coliATCC 47014 | Crescita buona |
Bibliografia
- Atlas, R.M., L.C. Parks (1993) Handbook of Microbiological Media. CRC Press, Inc. London.
- Lennox. 1955. Virology 1:190.
- Sambrook, Fritsch and Maniatis. 1989. Molecular cloning: a laboratory manual, 2nd ed. Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y.
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