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Terreni per biologia molecolare

LB Agar (Lennox)

Terreno raccomandato per il mantenimento e la coltivazione dei ceppi ricombinanti di E. coli.

Codice
LC-1083
Formato
500 g
Conservazione
da 2 a 25 °C
Validità minima garantita
15 mesi

LB Agar (Lennox) è un terreno nutrizionalmente ricco, sviluppato da Lennox per la crescita e il mantenimento di colture pure di ceppi ricombinanti di E. coli usati nelle procedure di microbiologia molecolare.

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CodiceFormatoPrezzo
LC-1083500 g

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Caratteristiche principali

Applicazioni

Preparazione e recupero di cellule competenti di Escherichia coli.

Settori

Terreni di coltura per biologia molecolare.

Preparazione

35 g in un litro di acqua distillata; far bollire per un minuto, sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.

Principio e uso

Questi ceppi derivano in genere da E. coli K12, che non sono in grado di produrre la vitamina B, perciò questo terreno è formulato per favorire la crescita dei microrganismi con esigenze nutrizionali elevate. Questo ceppo di E. coli è stato ulteriormente modificato con una mutazione specifica, per creare un ceppo auxotrofo che non è in grado di crescere su terreni nutrizionalmente carenti.

Il triptone fornisce azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. L'estratto di lievito è la fonte di vitamine, in particolare del gruppo B. Il cloruro di sodio fornisce gli elettroliti essenziali per il trasporto e l'equilibrio osmotico. L'agar batteriologico è l'agente solidificante. Se si desidera, si possono aggiungere anche antibiotici.

LB Agar (Lennox) ha un contenuto di cloruro di sodio diverso da quello di altri terreni come Luria Agar (Miller’s LB Agar) (LC-1552) o Luria Agar (Miller’s Modification) (LC-1308). Questo permette di scegliere la concentrazione di sale ottimale del terreno per un ceppo specifico.

Specifiche tecniche

SolubilitàSenza residui
AspettoPolvere fine
Colore del terreno disidratatoBeige
Colore del terreno preparatoAmbra, leggermente opalescente
pH finale (25 °C)7,0 ± 0,2
Quantità per litro35 g
Conservazioneda 2 a 25 °C

Formula

Componenteg/L
Agar batteriologico15
Cloruro di sodio5
Triptone10
Estratto di lievito5

Preparazione e uso

Preparazione

Sospendere 35 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti. Raffreddare a 45-50 °C, mescolare bene e distribuire in piastre.

Istruzioni per l'uso

  1. Eseguire la procedura sperimentale secondo l'uso o lo scopo appropriato.
  2. Inoculare e incubare a una temperatura di 35 ± 2 °C per 18-24 ore.

Controllo qualità

Prova microbiologica

Condizioni di incubazione: 35 ± 2 °C / 18-24 h.

MicrorganismoSpecifica
Escherichia coliATCC 23724Crescita buona
Escherichia coliATCC 33694Crescita buona
Escherichia coliATCC 33849Crescita buona
Escherichia coliATCC 39403Crescita buona
Escherichia coliATCC 47014Crescita buona

Bibliografia

  • Atlas, R.M., L.C. Parks (1993) Handbook of Microbiological Media. CRC Press, Inc. London.
  • Lennox. 1955. Virology 1:190.
  • Sambrook, Fritsch and Maniatis. 1989. Molecular cloning: a laboratory manual, 2nd ed. Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y.

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