Terreni disidratati
Rothe Broth (Glucose Broth With Azide)
Per la determinazione quantitativa degli enterococchi fecali.
- Codice
- LC-1238
- Categoria
- Terreni disidratati
- Formato
- 500 g
- Conservazione
- da 2 a 25 °C
- Validità minima garantita
- 15 mesi
Rothe Broth (Glucose Broth With Azide) è un terreno selettivo raccomandato da Mallmann e Seligmann per la quantificazione degli enterococchi in acque, alimenti e altri materiali sospettati di essere contaminati da acque reflue. Gli enterococchi sono i migliori indicatori di contaminazione fecale nelle acque, perché Escherichia coli è molto resistente al cloruro.
Caratteristiche principali
Applicazioni
Conta selettiva degli enterococchi.
Preparazione
34,7 g in un litro di acqua distillata; scaldare fino all'ebollizione, sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.
Principio e uso
La presenza di enterococchi è un indicatore di contaminazione fecale, soprattutto quando questa è avvenuta molto tempo prima e i batteri coliformi meno resistenti, compreso Escherichia coli, possono essere già morti al momento dell'analisi.
La miscela di peptoni e il peptone di caseina forniscono azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. Il glucosio è il carboidrato fermentabile che fornisce carbonio ed energia. Il cloruro di sodio fornisce gli elettroliti essenziali per il trasporto e l'equilibrio osmotico. L'uso della sodio azide per inibire in modo selettivo i batteri Gram-negativi comparve per la prima volta negli studi di Edwards (1938) sull'isolamento di Streptococcus agalactiae; in seguito si dimostrò che la sodio azide si può usare anche per l'isolamento degli enterococchi dalle acque.
Specifiche tecniche
| Solubilità | Senza residui |
|---|---|
| Aspetto | Polvere fine |
| Colore del terreno disidratato | Beige |
| Colore del terreno preparato | Marrone giallastro |
| pH finale (25 °C) | 7,2 ± 0,2 |
| Quantità per litro | 34,7 g |
| Conservazione | da 2 a 25 °C |
Formula
| Componente | g/L |
|---|---|
| Glucosio | 7,5 |
| Estratto di manzo | 4,5 |
| Miscela di peptoni | 15 |
| Sodio azide | 0,2 |
| Cloruro di sodio | 7,5 |
Preparazione e uso
Preparazione
Sospendere 34,7 grammi di terreno in un litro di acqua distillata (69,4 grammi se si desidera la doppia concentrazione). Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso fino all'ebollizione. NON SURRISCALDARE. Distribuire in contenitori adatti e sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.
Istruzioni per l'uso
Rothe Broth è ideale per la conta degli enterococchi con il metodo delle diluizioni seriali. Inoculare 10 mL del campione in provette da 10 mL di Rothe Broth a doppia concentrazione (oppure 1 mL del campione in 10 mL di terreno a concentrazione singola). Usare 5 provette per ogni diluizione (secondo Mallmann e Seligmann). Incubare tutte le provette a 35 ± 2 °C per 24-48 ore. La conferma degli enterococchi fecali si ottiene con il successivo inoculo delle provette positive in EVA Broth (LC-1230).
Controllo qualità
Prova microbiologica
Condizioni di incubazione: 35 ± 2 °C / 24-48 h.
| Microrganismo | Specifica |
|---|---|
| Enterococcus faecalisATCC 19433 | Crescita buona |
| Escherichia coliATCC 25922 | Crescita inibita |
| Staphylococcus aureusATCC 25923 | Crescita inibita |
| Enterococcus faecalisATCC 29212 | Crescita buona |
Bibliografia
- Mallmann W.L. Seligmann E.B. AJPH, 1950. 40 286-289
- Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater. Eleventh Edition APHA Inc. New-York 1960
- Edwards S.J. (1933) J. Comp. Path Therap., 46.211.
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