Terreni disidratati
EVA Broth (Ethyl, Violet, Azide, Litsky)
Terreno selettivo per la conferma e la rilevazione degli enterococchi e come rilevatore della contaminazione fecale nelle acque.
- Codice
- LC-1230
- Categoria
- Terreni disidratati
- Formato
- 500 g
- Conservazione
- da 2 a 25 °C
- Validità minima garantita
- 15 mesi
EVA Broth (Ethyl, Violet, Azide, Litsky) è un terreno selettivo specifico per la rilevazione e la conferma degli enterococchi in acque, altri campioni e alimenti. È un'indicazione di contaminazione fecale. EVA Broth, insieme a Rothe Broth (Glucose Broth with Azide) (LC-1238) come terreno presuntivo, si usa per la conta degli enterococchi fecali in acque, suolo e prodotti alimentari con la tecnica MPN.
Caratteristiche principali
Applicazioni
Rilevazione degli enterococchi.
Settori
Alimenti.
Preparazione
35,8 g in un litro di acqua distillata; far bollire per un minuto, sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.
Principio e uso
La presenza di enterococchi intestinali è un indicatore di contaminazione fecale, soprattutto quando la contaminazione è avvenuta molto tempo prima e i batteri coliformi, meno resistenti, tra cui Escherichia coli, sono già morti quando si esegue l'analisi.
La sodio azide e il violetto di etile inibiscono tutti i bacilli Gram-positivi e i cocchi Gram-positivi tranne gli enterococchi, e i batteri Gram-negativi. La miscela di peptoni fornisce azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. Il destrosio è il carboidrato fermentabile che fornisce carbonio ed energia. I fosfati di potassio agiscono da sistema tampone e il cloruro di sodio fornisce gli elettroliti essenziali per il trasporto e l'equilibrio osmotico.
Specifiche tecniche
| Solubilità | Senza residui |
|---|---|
| Aspetto | Polvere fine |
| Colore del terreno disidratato | Beige chiaro |
| Colore del terreno preparato | Grigiastro |
| pH finale (25 °C) | 7,0 ± 0,2 |
| Quantità per litro | 35,8 g |
| Conservazione | da 2 a 25 °C |
Formula
| Componente | g/L |
|---|---|
| Destrosio | 5 |
| Fosfato dipotassico | 2,7 |
| Fosfato monopotassico | 2,7 |
| Miscela di peptoni | 20 |
| Sodio azide | 0,4 |
| Cloruro di sodio | 5 |
| Violetto di etile | 0,0008 |
Preparazione e uso
Preparazione
Sospendere 35,8 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Distribuire quantità da 10 mL in provette e sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti. Si raccomanda di usare un inoculo abbondante, perché il terreno è molto selettivo e si usa nella seconda fase della conferma.
Istruzioni per l'uso
Le provette si inoculano con le diluizioni adatte, in serie di 3 provette per ogni diluizione, e si incubano a 35 ± 2 °C per 24-48 ore.
La comparsa di torbidità ed eventualmente la formazione di un bottone di crescita viola (porpora) sul fondo della provetta sono caratteristiche della crescita degli enterococchi.
Controllo qualità
Prova microbiologica
Condizioni di incubazione: 35 ± 2 °C / 24-48 h.
| Microrganismo | Specifica |
|---|---|
| Enterococcus faecalisATCC 19433 | Crescita buona |
| Streptococcus pyogenesATCC 19615 | Crescita inibita |
| Escherichia coliATCC 25922 | Crescita inibita |
| Staphylococcus aureusATCC 25923 | Crescita inibita |
| Enterococcus faecalisATCC 29212 | Crescita buona |
Bibliografia
- Litsky W. Mallmann W.L Fifield C.W. A.J.P.H 1953. 43. 873-879.
- Mallman and Seligman. 195 A.J.P.H 40:286.
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