Brilliant Green Bile Broth 2% ISO

Il digerito enzimatico di caseina fornisce azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. Il lattosio è il carboidrato fermentabile che fornisce carbonio ed energia. La bile di bue e il verde brillante inibiscono i batteri Gram-positivi e la maggior parte dei batteri Gram-negativi, tranne i coliformi. Impediscono anche la crescita degli anaerobi che fermentano il lattosio, come Clostridium perfringens, che potrebbero dare reazioni falsamente positive.

Questo terreno è raccomandato dalle norme ISO 4831 e ISO 4832 per la conferma dei coliformi. La produzione di gas a 30 °C o a 37 °C conferma la presenza di coliformi.

Formula tipica in g/L, adattata e/o integrata secondo necessità per soddisfare i criteri di prestazione.

Preparazione

Sospendere 40 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Distribuire in provette con campanelle di Durham per la raccolta e la rilevazione del gas e sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti. EVITARE DI SURRISCALDARE.

Quando il campione ha un volume di 1 mL o meno, distribuire il terreno in volumi da 10 mL. Per analizzare campioni da 10 mL, sciogliere 80 grammi di terreno in un litro di acqua distillata e distribuire nello stesso modo.

Istruzioni per l'uso

Per la conferma dei coliformi secondo ISO 4831 e 4832:

1. Inoculare le colonie tipiche delle piastre incubate di VRBL (LC-1093) in provette di Brilliant Green Bile Broth 2%.
2. Incubare le provette a una temperatura di 30 °C o di 37 °C per 24-48 ore.
3. Considerare coliformi le colonie che mostrano formazione di gas nelle campanelle di Durham.

Nota: nel caso del latte e dei prodotti a base di latte, la temperatura di incubazione è 30 °C.

Per la conferma di Escherichia coli:

1. Incubare Brilliant Green Bile Broth 2% a 44 ± 1 °C per 48 ore.
2. La torbidità del brodo e la produzione di gas nella campanella capovolta sono segni positivi.
3. Si esegue anche una prova di produzione dell'indolo a 44,5 °C in Peptone Tryptone Water (LC-1403).

• ISO 4831:2006 Microbiology of food and animal feeding stuffs - Horizontal method for the detection and enumeration of coliforms - Most probable number technique.
• ISO 4832:2006 Microbiology of food and animal feeding stuffs - Horizontal method for the enumeration of coliforms - Colony-count technique.
• Standard Methods for the Examination of Water and Sewage, 9th. Edition 195. 1946.
• Standard Methods for the Examination of Dairy Products, 9th. Edition 152. 1948.