Terreni disidratati
Urea Indole Broth ISO
Per la differenziazione degli enterobatteri in base alla produzione di ureasi e di indolo e alla transdeaminazione del triptofano (TDA).
- Codice
- LC-1227
- Categoria
- Terreni disidratati
- Formato
- 500 g
- Conservazione
- da 2 a 25 °C
- Validità minima garantita
- 15 mesi
- Norme
- ISO 10273
Urea Indole Broth si può usare per determinare la produzione di ureasi e di indolo da parte delle Enterobacteriaceae e dei microrganismi delle famiglie di Brucella, Bacillus, Micrococcus, micobatteri e Proteus.
Supplemento da aggiungere: Kovac's Reagent LC-5205
Caratteristiche principali
Applicazioni
Conferma degli enterobatteri.
Settori
Alimenti.
Norme
ISO 10273.
Preparazione
30 g in un litro di acqua distillata, aggiungere 10 mL di etanolo al 95 %; evitare di surriscaldare, non sterilizzare in autoclave.
Principio e uso
Il L-triptofano è un aminoacido essenziale e viene convertito in scatolo e indolo. Il cloruro di sodio mantiene l'equilibrio osmotico. I fosfati di potassio agiscono da sistema tampone. L'urea è una fonte di azoto per gli organismi che producono ureasi. Il rosso fenolo è l'indicatore di pH.
Questo terreno è raccomandato per l'identificazione presuntiva di Yersinia enterocolitica.
Specifiche tecniche
| Solubilità | Senza residui |
|---|---|
| Aspetto | Polvere fine |
| Colore del terreno disidratato | Rosa |
| Colore del terreno preparato | Arancio |
| pH finale (25 °C) | 6,8 ± 0,2 |
| Quantità per litro | 30 g |
Formula
| Componente | g/L |
|---|---|
| Fosfato dipotassico | 1 |
| Fosfato monopotassico | 1 |
| Rosso fenolo | 0,025 |
| Cloruro di sodio | 5 |
| Urea | 20 |
| L-triptofano | 3 |
Formula tipica in g/L, adattata e/o integrata secondo necessità per soddisfare i criteri di prestazione.
Preparazione e uso
Preparazione
Sospendere 30 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene. Aggiungere 10 mL di etanolo al 95 %. Distribuire in quantità da 1-5 mL in provette sterili. EVITARE DI SURRISCALDARE. NON STERILIZZARE IN AUTOCLAVE.
Se si desidera, aggiungere 2 g/L di agar per la rilevazione della motilità batterica.
Istruzioni per l'uso
- Preparare una sospensione densa del microrganismo isolato dai terreni in piastra.
- Inoculare le provette di Urea Indole Broth.
- Incubare a 35 ± 2 °C per 18-24 ore.
- Osservare dopo 3-4 ore se c'è ureasi positiva nelle provette in cui l'indicatore vira a un colore rosso violetto intenso (alcalinizzazione), tipico di Proteus o di Yersinia. Klebsiella e alcuni Citrobacter danno provette positive dopo 18 ore.
- La produzione di indolo si determina aggiungendo qualche goccia di Kovac's Reagent (LC-5205). Una prova positiva è indicata dalla comparsa di un colore rosso nello strato del reagente.
- La triptofano deaminasi (TDA) si dimostra aggiungendo a una coltura di 24 ore qualche goccia di una soluzione al 30 % di percloruro di ferro, diluita 1:3. La comparsa di un colore marrone o rosso-marrone indica una TDA positiva.
- Per l'identificazione presuntiva di Yersinia enterocolitica, inoculare e incubare a 30 °C per 24 ore. Se il terreno non è inoculato con una quantità sufficiente di inoculo, si possono avere falsi negativi.
Caratteristiche dei batteri
| Microrganismo | Urea | Indolo | TDA |
|---|---|---|---|
| Escherichia coli | (-) | (+) | (-) |
| Shigella dysenteriae, boydii, flexneri | (-) | (variabile) | (-) |
| Shigella sonnei | (-) | (-) | (-) |
| Salmonella | (-) | (-) | (-) |
| Salmonella arizonae SG III | (-) | (-) | (-) |
| Citrobacter | (-) | (-) | (-) |
| Edwardsiella | (-) | (+) | (-) |
| Proteus vulgaris | (+) | (+) | (+) |
| Proteus rettgeri | (+) | (+) | (+) |
| Proteus morganii | (+) | (+) | (+) |
| Proteus mirabilis | (+) | (-) | (+) |
| Providencia | (-) | (+) | (+) |
| Yersinia enterocolitica | (+) | (variabile) | (-) |
| Y. pseudotuberculosis | (+) | (-) | (-) |
| Klebsiella pneumoniae | (+ lento) | (-) | (-) |
| K. oxytoca | (+ lento) | (+) | (-) |
| Enterobacter aerogenes | (-) | (-) | (-) |
| E. cloacae, E. hafniae | (-) | (-) | (-) |
| E. agglomerans | (-) | (variabile) | (-) |
| Serratia marcescens, liquefaciens | (-) | (-) | (-) |
Controllo qualità
Prova microbiologica
Condizioni di incubazione: 35 ± 2 °C / 18-24 h.
| Microrganismo | Specifica |
|---|---|
| Proteus vulgarisATCC 13315 | Ureasi (+), indolo (+) |
| Klebsiella pneumoniaeATCC 13883 | Ureasi (+), indolo (-) |
| Salmonella typhimuriumATCC 14028 | Ureasi (-), indolo (-) |
| Yersinia enterocoliticaATCC 23715 | Ureasi (+), indolo (±) |
| Escherichia coliATCC 25922 | Ureasi (-), indolo (+) |
Bibliografia
- Roland F. Bourbon D, Sztrum S. Ann. Inst. Pasteur, 73. 914-916.
- ISO 10273:2003 Microbiology of food and animal feeding stuffs - Horizontal method for the detection of presumptive pathogenic Yersinia enterocolitica.
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