Kovac's Reagent

I batteri che possiedono l'enzima triptofanasi sono capaci di scindere e deaminare il triptofano con produzione di indolo. La prova dell'indolo si basa sulla formazione di un colorante rosso scuro quando l'indolo liberato reagisce con la 4-dimetilamminobenzaldeide. La produzione di indolo è una caratteristica importante nell'identificazione di molti microrganismi, in particolare per distinguere E. coli (+) dalle altre Enterobacteriaceae.

Per la rilevazione dell'indolo i microrganismi devono crescere in aerobiosi in un ambiente privo di glucosio e ricco di triptofano (Urea Indole Broth (LC-1227); Peptone Water (LC-1403); SIM Medium (LC-1514); Tryptophan Culture Broth (LC-1237); MIO Medium (LC-1510); Indole Nitrate Medium (LC-1504); Lauryl Sulfate Chromogenic Broth (LC-1465), ecc.). L'acqua peptonata è particolarmente adatta come substrato nello studio della produzione di indolo.

Una reazione positiva è indicata dalla comparsa di un colore rosa-rosso nella parte superiore della provetta. Le reazioni negative restano incolori o leggermente gialle.

Istruzioni per l'uso

• Inoculare leggermente il substrato di coltura con il microrganismo da analizzare.
• Incubare 24-48 ore a 35 °C.
• Aggiungere 4-5 gocce di Kovac's Reagent alla provetta e agitare delicatamente.

• N. Kovacs, Eine vereinfachte Methode zum Nachweis der Indolbildung durch Bakterien. Z. Immunitats. Forsch. Exp. Ther., 55, 311 (1928).
• Isenberg, H.D. Clinical Microbiology Procedures Handbook, Vol. I, II & III. American Society for Microbiology, Washington, D.C.
• H.H. Gadebusch, S. Gabriels, Modified Stable Kovacs's Reagent for detection of Indol. Am. J. Cli. Pathol., 26, 1373 (1956).