Terreni cromogenici
Lauryl Sulfate Chromogenic Broth
Terreno di arricchimento per la rilevazione simultanea dei coliformi totali e di E. coli in acque, alimenti e prodotti lattiero-caseari con il metodo fluorogenico.
- Codice
- LC-1465
- Categoria
- Terreni cromogenici
- Formato
- 500 g
- Conservazione
- da 2 a 25 °C
- Validità minima garantita
- 12 mesi
Lauryl Sulfate Chromogenic Broth permette di rilevare contemporaneamente la conta dei coliformi totali e quella di E. coli, grazie alla miscela cromogenica-fluorogenica.
Supplemento da aggiungere: Kovac's Reagent LC-5205
Caratteristiche principali
Applicazioni
Rilevazione, arricchimento selettivo e conta selettiva dei coliformi e di Escherichia coli.
Settori
Prodotti lattiero-caseari, alimenti, acque.
Preparazione
17 g in un litro di acqua distillata; far bollire per un minuto, distribuire e sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.
Principio e uso
La combinazione di composti cromogenici in Lauryl Sulfate Broth fornisce un doppio sistema indicatore. Questo terreno contiene un tampone fosfato per assicurare un'elevata crescita del numero totale di coliformi. Il lauril solfato inibisce i batteri Gram-positivi. I coliformi ed E. coli contengono la beta-galattosidasi, che scinde il substrato cromogenico. L'enzima che scinde il MUG è altamente specifico per E. coli e rende possibile la rilevazione simultanea dei coliformi totali e di E. coli. L'IPTG stimola la sintesi e aumenta l'attività della beta-galattosidasi.
Il viraggio di colore da ambra a blu-verdastro, dovuto alla reazione del substrato cromogenico, indica la presenza di coliformi. La fluorescenza blu alla luce UV permette la rilevazione rapida di E. coli, grazie al MUG.
Il triptofano favorisce la reazione dell'indolo dopo l'aggiunta di Kovac's Reagent (LC-5205). Questo reattivo rileva i microrganismi capaci di scindere il triptofano. Quando nel terreno è presente E. coli, l'indolo viene liberato e reagisce con la 4-dimetilamminobenzaldeide formando un colorante rosso scuro.
Specifiche tecniche
| Solubilità | Senza residui |
|---|---|
| Aspetto | Polvere fine |
| Colore del terreno disidratato | Beige |
| Colore del terreno preparato | Ambra limpido |
| pH finale (25 °C) | 6,8 ± 0,2 |
| Quantità per litro | 17 g |
Formula
| Componente | g/L |
|---|---|
| Miscela cromogenica-fluorogenica | 0,23 |
| Fosfato dipotassico | 2,7 |
| Fosfato monopotassico | 2 |
| Cloruro di sodio | 5 |
| Lauril solfato di sodio | 0,1 |
| Sorbitolo | 1 |
| Triptofano | 1 |
| Triptosio | 5 |
Formula tipica in g/L, adattata e/o integrata secondo necessità per soddisfare i criteri di prestazione.
Preparazione e uso
Preparazione
Sospendere 17 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Distribuire in contenitori adatti e sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.
Istruzioni per l'uso
Inoculare e incubare a 35 ± 2 °C per 18-24 ore. Osservare le provette alla luce UV (366 nm). La fluorescenza azzurra indica la presenza di E. coli.
Controllo qualità
Prova microbiologica
Condizioni di incubazione: 35 ± 2 °C / 18-24 h.
| Microrganismo | Specifica | Reazione caratteristica |
|---|---|---|
| Shigella flexneriATCC 12022 | Crescita buona | Colore del terreno invariato, fluorescenza (-) |
| Klebsiella aerogenesATCC 13048 | Crescita buona | Terreno blu-verdastro, fluorescenza (-), indolo (-) |
| Klebsiella pneumoniaeATCC 13883 | Crescita buona | Terreno blu-verdastro, fluorescenza (-), indolo (-) |
| Salmonella typhimuriumATCC 14028 | Crescita buona | Colore del terreno invariato, fluorescenza (-) |
| Escherichia coliATCC 25922 | Crescita buona | Terreno blu-verdastro, fluorescenza (+), indolo (+) |
| Citrobacter freundiiATCC 8090 | Crescita buona | Terreno blu-verdastro, fluorescenza (-) |
| Escherichia coliATCC 8739 | Crescita buona | Terreno blu-verdastro, fluorescenza (+), indolo (+) |
Bibliografia
- MANAFI, M., KNEIFEL, F., a. BASCON, S.: Fluorogenic and chromogenic substrates used in bacterial diagnosis. Microbiol. Rev. 55; 335-348 (1991).
- OSSMER, R.: Simultaneous Detection of Total Coliforms and E. coli-Fluorocult LMX-Broth. - 15th International Symposium/FOOD MICRO 1993. The International Committee on Food Microbiology and Hygiene, Bingen/Rhine (1993).
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