MIO Medium (Motility-Indole-Ornithine)

I peptoni di gelatina e di caseina forniscono azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. Forniscono anche il triptofano, necessario per la formazione dell'indolo. L'estratto di lievito è una fonte di vitamine, in particolare del gruppo B; il destrosio è il carboidrato fermentabile che fornisce carbonio ed energia. La L-ornitina si aggiunge per verificare la presenza dell'enzima ornitina decarbossilasi. Se il microrganismo possiede questo enzima, l'enzima si attiva nell'ambiente acido creato dalla fermentazione iniziale del destrosio. Una volta decarbossilato l'aminoacido, si produce la diammina putrescina. Il risultato è un'alcalinizzazione del terreno, che lo fa diventare blu scuro. I microrganismi privi dell'enzima restano acidi a causa della fermentazione, e il terreno diventa di colore giallo. Il porpora di bromocresolo è un indicatore di pH che indica l'attività della decarbossilasi; la bassa concentrazione di agar batteriologico serve per la motilità.

Formula tipica in g/L, adattata e/o integrata secondo necessità per soddisfare i criteri di prestazione.

Preparazione

Sospendere 31 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Distribuire in provette con tappo a vite e sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.

Istruzioni per l'uso

Inoculare MIO Medium per infissione e incubare in atmosfera aerobica per 18-24 ore a 35 ± 2 °C.

Se la reazione dell'indolo è negativa, incubare per altre 24 ore. Leggere le reazioni della motilità e dell'ornitina decarbossilasi prima di aggiungere Kovac's Reagent (LC-5205) per la prova dell'indolo. La motilità è indicata da torbidità nel terreno o da una crescita che si estende lontano dalla linea di inoculo. La decarbossilazione dell'ornitina è indicata da un colore porpora nel terreno. Una reazione negativa dell'ornitina produce un colore giallo sul fondo della provetta.

Per la prova dell'indolo:

1. Aggiungere da 3 a 4 gocce di Kovac's Reagent (LC-5205) e agitare delicatamente la provetta.
2. La comparsa di un colore rosso o rosa nello strato del reagente è un'indicazione positiva di indolo.
3. Kovac's Reagent rileva i microrganismi capaci di scindere il triptofano. Quando questi microrganismi sono presenti nel terreno, liberano indolo, che reagisce con la 4-dimetilamminobenzaldeide formando un colorante rosso scuro.
4. Confrontare i risultati con una provetta non inoculata.

• Ederer, G.M., and M. Clark. 1970. Motility-Indole-Ornithine medium. Appl. Microbiol. 2:849.
• Oberhofer, T.R., and R. Hajkowski. 1970. Evaluation of non-lactose-fermenting members of the Klebsiella-Enterobacter-Serratia Division. I. Biochemical characteristics. Am. J. Clin. Pathol. 54:720.