Terreni pronti all'uso
Standard Methods Agar (PCA) TLHTh. Double wrap. Irradiated.
Terreno per uso generale con neutralizzanti, per l'isolamento e la conta dei microrganismi sulle superfici.
- Codice
- LC-4552
- Categoria
- Terreni pronti all'uso
- Formato
- 30 piastre a contatto Rodac da 65 mm
- Controllo qualità ISO 17025
- Sì
- Conservazione
- da 2 a 25 °C
- Validità minima garantita
- 3 mesi
La formulazione di Plate Count Agar segue quella di Buchbinder et al., raccomandata nel loro studio sui terreni per la conta su piastra dei microrganismi.
Caratteristiche principali
Conta non selettiva degli aerobi.
Monitoraggio ambientale.
30 piastre a contatto irradiate, doppio involucro, con 15 ± 2 mL.
1 scatola con 5 blister (base in alluminio, PVDC e busta) da 6 piastre a contatto. Ogni confezione porta un indicatore di irraggiamento (8-14 kGy).
Descrizione e tecnica
Descrizione
La formulazione originale dell'agar standardizzato per la microbiologia lattiero-casearia è stata modificata per evitare l'aggiunta di latte. Questa nuova composizione permette la crescita della maggior parte dei microrganismi senza altre aggiunte.
La formulazione di questo terreno è equivalente a quella descritta dagli "Standard Methods for the Examination of Dairy Products", al "Tryptone Glucose Yeast Agar" della USP, a quella della "Deutsche Landwirtschaft" e al Plate Count Agar di APHA e AOAC. È il terreno di elezione per la conta su piastra di qualunque tipo di campione.
L'aggiunta degli agenti neutralizzanti TLHTh (Tween 80 - lecitina - istidina - tiosolfato di sodio) può inattivare diversi disinfettanti.
- La combinazione di lecitina, polisorbato 80 e istidina neutralizza le aldeidi e i composti fenolici.
- La combinazione di lecitina e polisorbato 80 neutralizza i composti di ammonio quaternario.
- Il polisorbato 80 neutralizza l'esaclorofene e i derivati mercuriali.
- Il tiosolfato di sodio neutralizza i composti alogenati.
- La lecitina neutralizza la clorexidina.
- L'istidina neutralizza la formaldeide.
Tecnica
Le piastre a contatto si usano nel controllo microbiologico della disinfezione e della pulizia delle superfici. Agiscono contemporaneamente da campionatore e da terreno di coltura per l'incubazione, senza bisogno di altri passaggi intermedi.
Le piastre hanno una forma adatta a questa funzione e si possono usare con diversi terreni di coltura, a seconda del tipo di microrganismo da controllare. In media le piastre offrono una superficie di contatto di circa 25 cm².
Per l'uso, togliere il coperchio e premere delicatamente il terreno di coltura sulla superficie da controllare, assicurando il contatto tra le due superfici. Si toglie la piastra a contatto e la si chiude con il coperchio, per evitare la contaminazione dall'aria. Si consiglia di fissare il coperchio con nastro adesivo e di etichettare il fondo con i dati del campionamento (luogo, data e ora).
Se le superfici da campionare sono ruvide, le piastre a contatto non fanno un buon contatto, anche aumentando la pressione. In questi casi si consiglia di delimitare un'area di 25 cm², strofinarla energicamente con un tampone sterile bagnato e poi strofinare il tampone sulla piastra a contatto.
Se si verifica l'efficacia di un processo di pulizia o di disinfezione, le piastre a contatto vanno usate entro due ore dalla fine del processo, assicurandosi che la superficie da campionare sia asciutta. Si consiglia di includere sempre controlli positivi, campionando l'area prima della disinfezione o le zone sporche accanto all'area disinfettata.
Il tecnico stabilisce la frequenza del campionamento e della disinfezione secondo criteri di prestazione. Applicare l'agar direttamente sulla superficie da monitorare, distribuendo la pressione su tutta la piastra per 10 secondi. Pulire la superficie in cui è stato raccolto il campione, per togliere ogni traccia di agar.
Le piastre inoculate si incubano a 30 °C per 48-72 ore e si esaminano ogni giorno.
Nota: le piastre a contatto si usano per monitorare la contaminazione microbiologica delle superfici e dell'aria in camere bianche, isolatori, RABS, industrie alimentari e ospedali. Il doppio/triplo involucro irradiato garantisce che la confezione stessa non contamini l'ambiente, perché il primo involucro si toglie appena prima di entrare nell'area pulita.
Presentazione
| Presentazione | 30 piastre a contatto irradiate, doppio involucro |
|---|---|
| Riempimento | 15 ± 2 mL |
| Confezione | 1 scatola con 5 blister (base in alluminio, PVDC e busta) da 6 piastre a contatto. Ogni confezione porta un indicatore di irraggiamento (8-14 kGy). |
Composizione
| Componente | g/L |
|---|---|
| Peptone di caseina | 5,0 |
| Estratto di lievito | 2,5 |
| D(+) glucosio | 1,0 |
| Istidina | 1,0 |
| Lecitina | 0,7 |
| Polisorbato 80 | 5,0 |
| Tiosolfato di sodio | 0,5 |
| Agar | 15,0 |
Controllo qualità
Controllo fisico-chimico
| Colore | Giallastro |
|---|---|
| pH | 7,2 ± 0,2 a 25 °C |
Controllo microbiologico
Inoculo: intervallo pratico 100 ± 20 UFC, minimo 50 UFC (produttività).
Aerobiosi. Incubazione a 30 ± 1 °C, lettura a 72 ± 3 h.
Controllo microbiologico secondo ISO 11133:2014/Amd 1:2018.
| Microrganismo | Crescita |
|---|---|
| Bacillus subtilisATCC 6633, WDCM 00003 | Buona (≥ 70 %) |
| Escherichia coliATCC 8739, WDCM 00012 | Buona (≥ 70 %) |
| Listeria monocytogenesATCC 35152 | Buona (≥ 70 %) |
| Staphylococcus aureusATCC 6538, WDCM 00032 | Buona (≥ 70 %) |
Controllo di sterilità
Incubazione 48 h a 30-35 °C e 48 h a 20-25 °C: NESSUNA CRESCITA.
Controllo a 7 giorni dopo l'incubazione nelle stesse condizioni.
Bibliografia
- ATLAS, R.M. & L.C. PARKS (1993) Handbook of Microbiological Media. CRC Press, Inc. London.
- BUCHBINDER, L., Y. BARIS & L. GOLDSTEIN (1953) Further studies on new milk-free media for the standard plate count of dairy products. Am. J. Public Health 43:869-872.
- CLESCERI, L.S., A.E. GREENBERG and A.D. EATON (1998) Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater. 20th ed., APHA, AWWA, WPCF. Washington.
- DIN 10192 (1971) Prüfungsbestimmungen für Milch und Milcherzeugnisse. Deutsche Landwirtschaft, Fachbereit und Ernahrung.
- DOWNES, F.P. & K. ITO (2001) Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods. 4th ed., APHA, Washington.
- FIL/IDF Standards 3 (1958), 100, 101 (1981), 109 (1982) and 132 (2004).
- HORWITZ, W. (2000) Official Methods of Analysis. AOAC International. Gaithersburg.
- IFU Method No. 6 (1996) Mesophilic, thermoduric and thermophilic bacteria: Spores Count. D-1 Mesophilic Aerobic Sporeforming bacteria: Spores count.
- ISO 4833 (2003) Microbiology of food and animal feeding stuffs. Horizontal method for the enumeration of microorganisms. Colony count technique at 30 °C.
- ISO 8552 (2004) Milk - Estimation of psychrotrophic microorganisms. Colony count technique at 21 °C (Rapid method).
- ISO 11133:2014/Amd 1:2018. Microbiology of food, animal feed and water. Preparation, production, storage and performance testing of culture media.
- ISO 17410 (2019) Horizontal method for the enumeration of psychrotrophic microorganisms.
- MARSHALL, R.T. (1992) Standard Methods for the Examination of Dairy Products. 16th ed. APHA. Washington.
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