Trypticasein Soy Agar (TSA) with Neutralizings. Double Wrapped. Irradiated

Descrizione

Terreno classico per l'esame microbiologico dei prodotti non sterili secondo i metodi armonizzati delle farmacopee.

L'aggiunta degli agenti neutralizzanti TLHTh (Tween 80 - lecitina - istidina - tiosolfato di sodio) può inattivare diversi disinfettanti.

• La combinazione di lecitina, polisorbato 80 e istidina neutralizza le aldeidi e i composti fenolici.
• La combinazione di lecitina e polisorbato 80 neutralizza i composti di ammonio quaternario.
• Il polisorbato 80 neutralizza l'esaclorofene e i derivati mercuriali.
• Il tiosolfato di sodio neutralizza i composti alogenati.
• La lecitina neutralizza la clorexidina.
• L'istidina neutralizza la formaldeide.

Tecnica

Le piastre a contatto si usano nel controllo microbiologico della disinfezione e della pulizia delle superfici. Agiscono contemporaneamente da campionatore e da terreno di coltura per l'incubazione, senza bisogno di altri passaggi intermedi.

Le piastre hanno una forma adatta a questa funzione e si possono usare con diversi terreni di coltura, a seconda del tipo di microrganismo da controllare. In media le piastre offrono una superficie di contatto di circa 25 cm².

Per l'uso, togliere il coperchio e premere delicatamente il terreno di coltura sulla superficie da controllare, assicurando il contatto tra le due superfici. Si toglie la piastra a contatto e la si chiude con il coperchio, per evitare la contaminazione dall'aria. Si consiglia di fissare il coperchio con nastro adesivo e di etichettare il fondo con i dati del campionamento (luogo, data e ora).

Se le superfici da campionare sono ruvide, le piastre a contatto non fanno un buon contatto, anche aumentando la pressione. In questi casi si consiglia di delimitare un'area di 25 cm², strofinarla energicamente con un tampone sterile bagnato e poi strofinare il tampone sulla piastra a contatto.

Se si verifica l'efficacia di un processo di pulizia o di disinfezione, le piastre a contatto vanno usate entro due ore dalla fine del processo, assicurandosi che la superficie da campionare sia asciutta. Si consiglia di includere sempre controlli positivi, campionando l'area prima della disinfezione o le zone sporche accanto all'area disinfettata.

Il tecnico stabilisce la frequenza del campionamento e della disinfezione secondo criteri di prestazione. Applicare l'agar direttamente sulla superficie da monitorare, distribuendo la pressione su tutta la piastra per 10 secondi. Pulire la superficie in cui è stato raccolto il campione, per togliere ogni traccia di agar.

Le piastre inoculate si incubano a 30-35 °C per 24-72 h (batteri) e per 3-5 giorni per i funghi (lieviti e muffe). Si esaminano ogni giorno.

Nota: le piastre a contatto si usano per monitorare la contaminazione microbiologica delle superfici e dell'aria in camere bianche, isolatori, RABS, industrie alimentari e ospedali. Il doppio/triplo involucro irradiato garantisce che la confezione stessa non contamini l'ambiente, perché il primo involucro si toglie appena prima di entrare nell'area pulita.

Controllo fisico-chimico

Controllo microbiologico

Prova di promozione della crescita secondo le monografie e i metodi di prova armonizzati delle farmacopee e ISO 11133:2014.

Inoculo: intervallo pratico 100 ± 20 UFC, minimo 50 UFC (produttività) / 10⁴-10⁶ (selettività).

Aerobiosi. Incubazione a 30-35 °C. Lettura dopo 18-24 h e fino a 72 h per i batteri e dopo 3-5 giorni per i funghi.

Controllo di sterilità

Incubazione 48 h a 30-35 °C e 48 h a 20-25 °C: NESSUNA CRESCITA.

• ATLAS, R.M. & L.C. PARKS (1993) Handbook of Microbiological Media. CRC Press, Inc. London.
• COLIPA (1997) Guidelines on Microbial Quality Management (MQM). Brussels.
• DOWNES, F.P. & K. ITO (2001) Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Food, 4th ed, ASM, Washington D.C.
• EUROPEAN PHARMACOPOEIA 8.0 (2014) 8th ed. § 2.6.13. Microbiological examination of non-sterile products: Test for specified microorganisms. Harmonised Method. EDQM. Council of Europe. Strasbourg.
• FDA (Food and Drug Administration) (1998) Bacteriological Analytical Manual. 8th ed. Rev. A. AOAC International. Gaithersburg. MD.
• HORWITZ, W. (2000) Official Methods of Analysis of AOAC INTERNATIONAL, 17th ed. Gaithersburg, MD. USA.
• ISO 9308-1 Standard (2000) Water Quality. Detection and enumeration of E. coli and coliform bacteria. Membrane filtration method.
• ISO 11133:2014/Amd 1:2018. Microbiology of food, animal feed and water. Preparation, production, storage and performance testing of culture media.
• ISO 16212 Standard (2017) Cosmetics - Microbiology - Enumeration of yeast and mould.
• ISO 21149 Standard (2017) Cosmetics - Microbiology - Enumeration and detection of aerobic mesophilic bacteria.
• ISO 21150 Standard (2015) Cosmetics - Microbiology - Detection of Escherichia coli.
• ISO 22717 Standard (2015) Cosmetics - Microbiology - Detection of Pseudomonas aeruginosa.
• ISO 22718 Standard (2015) Cosmetics - Microbiology - Detection of Staphylococcus aureus.
• ISO/TS 22964 (2006) Milk and milk products - Detection of Enterobacter sakazakii.
• PASCUAL ANDERSON, Mª R. (1992) Microbiología Alimentaria. Díaz de Santos S.A., Madrid.
• USP 33 - NF 28 (2011) <62> Microbiological examination of non-sterile products: Test for specified microorganisms. Harmonised Method. USP Corp. Inc. Rockville. MD. USA.