Agar Test pH 8,0 for Inhibition Test

Gli inibitori antimicrobici contenuti nei campioni diffondono nei terreni nutritivi e provocano la formazione di zone di inibizione prive di crescita sulle piastre, altrimenti coperte da una crescita fitta. Sono necessarie prove ripetute a pH 6,0, pH 8,0 e pH 7,2, perché la penicillina e la streptomicina hanno la massima attività rispettivamente a pH 6,0 e 8,0, mentre l'optimum di attività dei sulfamidici si trova a pH 7,2. L'aggiunta di trimetoprim a Test Agar pH 7,2 aumenta notevolmente la sensibilità del sistema di prova ai sulfamidici.

Un'inibizione completa della crescita con una zona di inibizione di almeno 2 mm si considera un risultato positivo. Una zona di inibizione di 1-2 mm va considerata dubbia. Questo vale solo se i controlli, preparati contemporaneamente, mostrano zone di inibizione di circa 6 mm.

Formula tipica in g/L, adattata e/o integrata secondo necessità per soddisfare i criteri di prestazione.

Preparazione

Sospendere 27,5 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti. Raffreddare a 45-50 °C e aggiungere in condizioni asettiche una sospensione di spore di Bacillus subtilis (BGA) contenente circa 1 x 10⁷ UFC/mL (concentrazione finale nel terreno 1 x 10⁴ UFC/mL). Se si desidera, aggiungere una sospensione di Micrococcus luteus ATCC 9341. Versare in piastre.

Istruzioni per l'uso

1. Preparare i campioni di carne tagliando fette di tessuto spesse 2 mm e di 8 mm di diametro. Per la prova completa a 3 piastre servono in tutto 6 dischi (Test Agar pH 6,0 LC-2022, pH 7,2 e pH 8,0).
2. Con pinze sterili, porre due dei dischi in posizioni diametralmente opposte su ogni piastra di prova.
3. Porre in condizioni asettiche un disco di controllo adatto su ognuna delle tre piastre.
4. Incubare le piastre a 30 °C per 18-24 ore.

• Arbeitsgruppe des Instituts für Lebensmitteltechnologie und Verpackung der Technischen Universität München: Merkblätter für die Prüfung von Packmitteln, Merkblatt 18 "Prüfung auf antimikrobielle Bestandteile in Packstoffen". - Verpackgs.-Rdsch., 25; Techn.-wiss. Beilagen; 5-8 (1974).