TOS Propionate Agar Base ISO

Il peptone di caseina fornisce azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. L'estratto di lievito è fonte di vitamine, in particolare del gruppo B. Il solfato di magnesio permette di rilevare i bifidobatteri presenti in piccolo numero o danneggiati. Il solfato di ammonio agisce come fonte di azoto durante la crescita. I fosfati di potassio agiscono da sistema tampone. La L-cisteina cloridrato è l'agente riducente. Il transgalatto-oligosaccaride (TOS) favorisce la crescita dei bifidobatteri usati nei prodotti lattiero-caseari, perché è un fattore di crescita specifico per tutti i bifidobatteri, mentre gli altri batteri lattici non possono utilizzare questo saccaride. Il propionato di sodio inibisce la flora di accompagnamento. L'antibiotico mupirocina sale di litio (MUP) inibisce la crescita della maggior parte dei batteri lattici comunemente usati nei prodotti lattiero-caseari fermentati e non fermentati.

Formula tipica in g/L, adattata e/o integrata secondo necessità per soddisfare i criteri di prestazione.

Preparazione

Sospendere 62,5 grammi di terreno in 990 mL di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Questo terreno è sensibile al calore. Si consiglia di sterilizzare in autoclave piccole quantità (95-190 mL). Sterilizzare in autoclave a 115 ± 3 °C per 15 minuti. Raffreddare a 48 °C a bagnomaria e, se si desidera, aggiungere in condizioni asettiche due fiale di MUP Selective Supplement (LC-6074). Omogeneizzare delicatamente e distribuire in contenitori sterili.

Nota: dopo la sterilizzazione in autoclave il terreno è leggermente opalescente. L'opalescenza scompare quando il terreno viene raffreddato a 48 ± 1 °C. La base è stabile per 4 ore a bagnomaria.

Secondo ISO 29981

Per la conta dei bifidobatteri presunti secondo ISO 29981:

1. Preparare il campione iniziale secondo la materia prima.
2. Eseguire le diluizioni decimali.
3. Inoculare 1 mL di ogni diluizione in piastre di Petri vuote. Versare 12-15 mL del terreno TOS propionato preparato. Mescolare il contenuto senza incorporare aria.
4. Quando il terreno si è solidificato, incubare le piastre in un incubatore anaerobico a 37 °C per 72 ± 3 h.
5. Conta e conferma delle colonie.

• ISO 29981/IDF 220. Milk products - Enumeration of presumptive bifidobacteria - Colony count technique at 37 °C (2010).