Terreni disidratati
APT Agar (All Purpose Tween)
Per la conta e la coltivazione dei batteri lattici eterofermentanti, compresi lattobacilli, leuconostoc e streptococchi lattici.
- Codice
- LC-2049
- Categoria
- Terreni disidratati
- Formato
- 500 g
- Conservazione
- da 2 a 25 °C
- Validità minima garantita
- 15 mesi
APT Agar fu formulato da Deibel, Evans e Niven mentre studiavano i batteri che richiedono tiamina e i lattobacilli eterofermentanti. Lactobacillus costituisce una parte importante del gruppo dei batteri lattici, molto diffusi in natura. Convertono il lattosio e altri zuccheri in acido lattico e per questo sono chiamati Lactobacillus. Questo terreno è raccomandato per l'esame microbiologico di carne in scatola, pollame, crauti e altri alimenti. APT Agar si usa anche nel dosaggio microbiologico della tiamina.
Caratteristiche principali
Applicazioni
Conta selettiva dei batteri lattici.
Settori
Alimenti.
Preparazione
59,5 g in 1 litro di acqua distillata con 0,1 g di cicloesimide e 0,2 mL di Tween 80; far bollire per un minuto, sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.
Principio e uso
APT Agar contiene una miscela di peptoni, che agisce come fonte di carbonio, azoto, vitamine e minerali. L'estratto di lievito fornisce vitamine e nutrienti del complesso B, necessari per la crescita dei batteri. Il destrosio è la fonte di carboidrati. Il cloruro di manganese, il solfato di magnesio e il solfato ferroso sono essenziali per la replicazione dei lattobacilli e degli streptococchi lattici. Il polisorbato 80 è una fonte di acidi grassi necessari ai lattobacilli. Il citrato di sodio inibisce in parte la crescita dei batteri Gram-negativi.
Specifiche tecniche
| Solubilità | Senza residui |
|---|---|
| Aspetto | Polvere fine |
| Colore del terreno disidratato | Beige |
| Colore del terreno preparato | Ambra, leggermente opalescente |
| pH finale (25 °C) | 6,7 ± 0,2 |
| Quantità per litro | 59,5 g |
| Conservazione | da 2 a 25 °C |
Formula
| Componente | g/L |
|---|---|
| Agar batteriologico | 13,5 |
| D(+) glucosio | 10 |
| Solfato ferroso | 0,004 |
| Solfato di magnesio | 0,8 |
| Cloruro di manganese (II) | 0,14 |
| Peptone | 12,5 |
| Cloruro di sodio | 5 |
| Citrato di sodio | 5 |
| Tiamina cloridrato | 0,001 |
| Estratto di lievito | 7,5 |
| Idrogenofosfato di potassio | 5 |
Formula tipica in g/L, adattata e/o integrata secondo necessità per soddisfare i criteri di prestazione.
Preparazione e uso
Preparazione
Sospendere 59,5 grammi di terreno in 1 litro di acqua distillata. Aggiungere 0,1 grammi di cicloesimide sciolti in una quantità minima di etanolo al 40 % e 0,2 mL di Tween 80. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.
Istruzioni per l'uso
Per la conta:
- Diluire il materiale del campione e inoculare APT Agar con il metodo per inclusione.
- Incubare per 1-2 giorni a 35 °C in aerobiosi.
Per l'identificazione:
- Inoculare con le colonie sospette per identificare i batteri che causano l'inverdimento dei prodotti a base di carne. Trasferire un campione della coltura sulla superficie di taglio di una salsiccia affumicata.
- Mettere la salsiccia in una piastra di Petri contenente un pezzo di carta da filtro bagnata ("camera umida").
- Incubare per 18-24 ore a 32 °C e osservare se compare una colorazione verde.
- Un campione della salsiccia non inoculato serve da controllo.
- Per escludere altri batteri che formano pigmenti (per esempio Pseudomonas), si deve eseguire una prova di verifica (per esempio prova di Gram positiva, prova della catalasi negativa, prova della nitratasi negativa, prova della perossidasi positiva, produzione di acetoina dal glucosio, produzione di ammoniaca dall'arginina, ecc.).
Controllo qualità
Prova microbiologica
Condizioni di incubazione: 35 °C / 18-24 h.
| Microrganismo | Specifica |
|---|---|
| Lactococcus lactis ssp. lactisATCC 19435 | Crescita buona |
| Lacticaseibacillus caseiATCC 393 | Crescita buona |
| Lactobacillus acidophilusATCC 4356 | Crescita buona |
| Lactiplantibacillus plantarumATCC 8014 | Crescita buona |
| Lactobacillus fermentumATCC 9338 | Crescita buona |
| Lactobacillus rhamnosusATCC 9595 | Crescita buona |
Bibliografia
- Evans and Niven, 1951, J. Bact., 62:599.
- Downes F. P. and Ito K. (Eds.), 2001, Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods, 4th ed., APHA, Washington D.C.
- J.B. Evans and C.F. Niven, Nutrition of the heterofermentative Lactobacilli that cause greening of cured meat products, J. Bact., 62, 599 (1951)
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