BCP Glucose Agar

Questo terreno è raccomandato da ISO 11059 per la conferma di Pseudomonas spp. nel latte e nei prodotti a base di latte. BCP Glucose Agar è stato raccomandato anche da ISO 21528:2014 per la conferma delle Enterobacteriaceae.

Il triptone e l'estratto di lievito forniscono azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. Il D-glucosio è il carboidrato fermentabile che fornisce carbonio ed energia. Il cloruro di sodio fornisce gli elettroliti essenziali per il trasporto e l'equilibrio osmotico. Il porpora di bromocresolo è un indicatore di pH. L'agar batteriologico è l'agente solidificante.

I microrganismi che fermentano il glucosio producono colonie gialle (acido) e quelli che non lo fermentano colonie porpora. Le colonie ossidasi-negative e glucosio-positive sono confermate come Enterobacteriaceae.

Formula tipica in g/L, adattata e/o integrata secondo necessità per soddisfare i criteri di prestazione.

Preparazione

Sospendere 41,5 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Distribuire in contenitori adatti e sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.

Istruzioni per l'uso

Per la conta di Pseudomonas spp. nel latte e nei prodotti a base di latte:

1. Preparare la sospensione iniziale e le diluizioni.
2. Trasferire 0,1 mL del campione in esame o 0,1 mL della sospensione iniziale su una piastra di PPA. Ripetere con le diluizioni successive.
3. Incubare le piastre a 25 ± 1 °C per 48 ± 2 h.
4. Per la conferma, seminare per striscio ogni colonia selezionata su piastre di Nutrient Agar e incubare a 25 ± 1 °C per 24-48 h.
5. Per la conferma eseguire la reazione dell'ossidasi e la prova di fermentazione del glucosio.
6. Per la prova di fermentazione del glucosio, inoculare per infissione una colonia dal Nutrient Agar in provette contenenti BCP Glucose Agar e incubare a 25 ± 1 °C per 24 ± 3 h senza chiudere ermeticamente le provette.
7. Considerare colonie di Pseudomonas le colonie con reazione dell'ossidasi (+) e fermentazione del glucosio (-).

• ISO/TS 11059 Milk and milk products - Method for the enumeration of Pseudomonas spp.
• ISO 21528-2:2004 Microbiology of food and animal feeding stuffs - Horizontal methods for the detection and enumeration of Enterobacteriaceae - Part 2: Colony-count method.
• Drigalsky, C. (1902) Über ein Verfahren zum Nachweis der typhusbacillen.