Clostridium Perfringens Supplement (TSC)

Descrizione

Il metabisolfito di sodio e il citrato ferrico ammonico si usano come indicatore della riduzione del solfito da parte di Clostridium perfringens spp., che produce colonie nere in TSC Agar.

Tecnica

Raccogliere, diluire e preparare campioni e volumi secondo le specifiche, le direttive, le norme ufficiali e/o i risultati attesi.

Ricostituire la fiala in condizioni asettiche e aggiungerla a 500 mL di agar base fuso e raffreddato a 50 °C.

Non surriscaldare dopo l'aggiunta del supplemento.

Versare il terreno completo in piastre di Petri (o in provette) e, una volta solidificato su una superficie piana, seminare le piastre per striscio, con il metodo a spirale o con serie di diluizioni.

Incubare le piastre in atmosfera anaerobica a 35 ± 2 °C per 24-24 h. Per ottenere un terreno più selettivo, incubare a 44 ± 1 °C.

A seconda del campione o delle specifiche possono essere necessari tempi di incubazione più lunghi di quelli indicati sopra o temperature di incubazione diverse.

Dopo l'incubazione, contare tutte le colonie comparse sulla superficie dell'agar.

C. perfringens cresce in colonie nere, per la precipitazione del solfuro di ferro.

L'isolamento presuntivo di Clostridium perfringens va confermato con ulteriori prove microbiologiche e biochimiche.

Ricostituire la fiala liofilizzata originale aggiungendo 6 mL di acqua distillata sterile.

Nota: ogni fiala è sufficiente per integrare 500 mL di terreno (TSC Agar Base).

Controllo fisico-chimico

Controllo microbiologico

Ricostituire 1 fiala come indicato in Composizione; agitare e sciogliere completamente.

Aggiungere 1 fiala a 500 mL di terreno base. NON RISCALDARE dopo l'aggiunta del supplemento.

Metodologia analitica secondo ISO 11133:2014/Amd 1:2018; A2:2020.

Anaerobiosi. Incubazione a 44 ± 1 °C per 21 ± 3 h.

Controllo di sterilità

Aggiungere 5 mL del campione a 100 mL di TSB e a 100 mL di Thioglycollate.

Incubazione 48 ore a 30-35 °C e 48 ore a 20-25 °C: NESSUNA CRESCITA.

Controllo a 7 giorni dopo l'incubazione nelle stesse condizioni.

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