Supplementi e additivi
Fecal Coliforms Supplement
Supplemento per l'isolamento dei coliformi fecali.
- Codice
- LC-6023
- Categoria
- Supplementi e additivi
- Formato
- 10 flaconcini, ciascuno per 500 mL di terreno
- Conservazione
- da 2 a 8 °C
- Validità minima garantita
- 15 mesi
- Ordine minimo
- 20 confezioni
Fecal Coliforms Broth Base (m-FC) (LC-1121) e Fecal Coliforms Agar Base (m-FC) (LC-1127) sono preparati secondo la formula proposta da Geldreich, Clark e Bert e si usano per la coltivazione e la conta dei coliformi fecali. Questi terreni sono adatti alla tecnica di filtrazione su membrana ad alta temperatura. Molte procedure standard prevedono l'uso dei terreni Fecal Coliforms per le analisi di acque e alimenti.
Caratteristiche principali
Crescita e conta selettiva dei coliformi.
Acque.
10 fiale liofilizzate con 6 ± 0,1 g.
Fiale di vetro da 23x60 mm, etichettate, tappo in plastica bianco - 10 fiale per scatola.
Descrizione e tecnica
Descrizione
I coliformi fecali si distinguono dagli altri coliformi di origine ambientale per la loro capacità di crescere a 44,5 ± 0,5 °C.
Il proteoso e il triptosio forniscono azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. L'estratto di lievito è la fonte di vitamine, in particolare del gruppo B, essenziali per la crescita batterica. Il lattosio è il carboidrato fermentabile, fonte di carbonio e di energia. I sali biliari inibiscono la crescita dei batteri Gram-positivi. Il cloruro di sodio mantiene l'equilibrio osmotico. Il blu di anilina e l'acido rosolico sono gli indicatori differenziali e sopprimono la crescita dei batteri Gram-positivi. L'agar batteriologico è l'agente solidificante.
Preparazione
Ricostituire in modo asettico 1 fiala con 5 mL di soluzione all'1 % di NaOH 0,2 N. Mescolare delicatamente fino a completa dissoluzione e aggiungere in modo asettico a 500 mL di Fecal Coliforms Agar Base (m-FC) (LC-1127) o di Fecal Coliforms Broth Base (m-FC) (LC-1121), dopo che il terreno si è raffreddato a 45-50 °C. Mescolare bene e distribuire in contenitori sterili.
Istruzioni per l'uso
Tecnica di filtrazione su membrana:
Quando il supplemento si aggiunge a Fecal Coliforms Broth Base (m-FC) (LC-1121):
- Mettere la membrana filtrante, attraverso cui è stato filtrato il campione, sulla parte superiore del tampone assorbente saturato con il terreno nella piastra di Petri.
- Incubare le piastre per 24 ± 2 ore, una serie come controllo a 35 ± 2 °C e le altre a 44,5 ± 0,5 °C.
- Osservare i coliformi e contare le colonie.
Quando il supplemento si aggiunge a Fecal Coliforms Agar Base (m-FC) (LC-1127):
- Mettere la membrana filtrante, attraverso cui è stato filtrato il campione, sulla parte superiore della piastra di Petri con l'agar solidificato.
- Incubare le piastre per 24 ± 2 ore, una serie come controllo a 35 ± 2 °C e le altre a 44,5 ± 0,5 °C.
- Osservare i coliformi e contare le colonie.
Il sistema di indicatori differenziali (blu di anilina e acido rosolico) dà un colore blu alle colonie dei coliformi fecali. Gli altri enterobatteri diventano rossi.
Presentazione
| Presentazione | 10 fiale liofilizzate |
|---|---|
| Riempimento | 6 ± 0,1 g |
| Confezione | Fiale di vetro da 23x60 mm, etichettate, tappo in plastica bianco - 10 fiale per scatola. |
Composizione
| Componente | g/fiala |
|---|---|
| Acido rosolico | 0,05 |
Ricostituire la fiala liofilizzata originale aggiungendo 5 mL di soluzione all'1 % di NaOH 0,2 N.
Nota: ogni fiala è sufficiente per integrare 500 mL di Fecal Coliforms Agar Base (m-FC) o di Fecal Coliforms Broth Base (m-FC).
Controllo qualità
Controllo fisico-chimico
| Colore | Rosso - arancio |
|---|
Controllo microbiologico
Ricostituire 1 fiala come indicato in Composizione; agitare e sciogliere completamente.
Aggiungere 1 fiala a 500 mL di terreno base. NON RISCALDARE dopo l'aggiunta del supplemento.
Filtrazione su membrana / intervallo pratico 100 ± 20 UFC, minimo 50 UFC (produttività) / 10⁴-10⁶ UFC (selettività) / ≥ 10³ UFC (specificità).
Metodologia analitica secondo ISO 11133:2014/Amd 1:2018; A2:2020.
Aerobiosi. Incubazione a 44 ± 0,5 °C. Lettura a 24 ± 2 h.
Aerobiosi. Incubazione a 35 ± 2 °C. Lettura a 24 ore.
| Microrganismo | Crescita |
|---|---|
| Shigella flexneriATCC 12022, WDCM 00126 (35 °C) | Buona - colonie rosse |
| Shigella flexneriATCC 12022, WDCM 00126 (44,5 °C) | Inibito |
| Salmonella typhimuriumATCC 14028, WDCM 00031 (35 °C) | Buona - colonie rosse |
| Salmonella typhimuriumATCC 14028, WDCM 00031 (44,5 °C) | Inibito |
| Enterococcus faecalisATCC 19433, WDCM 00009 (35 °C) | Inibito |
| Enterococcus faecalisATCC 19433, WDCM 00009 (44,5 °C) | Inibito |
| Escherichia coliATCC 25922, WDCM 00013 (37 °C) | Buona (≥ 50 %) - colonie blu |
| Escherichia coliATCC 25922, WDCM 00013 (44,5 °C) | Buona (≥ 50 %) - colonie blu |
Controllo di sterilità
Incubazione 48 ore a 30-35 °C e 48 ore a 20-25 °C: NESSUNA CRESCITA.
Controllo a 7 giorni dopo l'incubazione nelle stesse condizioni.
Bibliografia
- Geldreich, Clark and Kabler, 1963. USPHS, HEW. Personal Communication.
- Geldreich, Clark, Huff and Bert, 1965. Journal of American Water Works Association, 57:208.
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