Bacillus Cereus Supplement ISO

Descrizione

Questi terreni permettono di rilevare in modo facile e rapido un piccolo numero di Bacillus cereus in presenza di un gran numero di contaminanti degli alimenti: Bacillus cereus cresce in colonie molto tipiche, che ne permettono una rapida identificazione macroscopica.

• PEMBA: colonie blu, circondate da una zona chiara di tuorlo d'uovo.
• MYP: colonie rosa brillante opache, con alone chiaro di lecitinasi.

Tecnica

Raccogliere, diluire e preparare campioni e volumi secondo le specifiche, le direttive, le norme ufficiali e/o i risultati attesi.

Ricostituire la fiala con il diluente sterile in condizioni asettiche e aggiungerla a 450 mL di agar base fuso e raffreddato a 50 °C, già integrato anche con 50 mL di Egg Emulsion sterile.

Non surriscaldare dopo l'aggiunta del supplemento.

Versare il terreno completo in piastre di Petri e, una volta solidificato su una superficie piana, seminare le piastre per striscio o con il metodo a spirale.

Incubare le piastre in atmosfera aerobica a 30 ± 1 °C per 24-48 h.

A seconda del campione o delle specifiche possono essere necessari tempi di incubazione più lunghi di quelli indicati sopra o temperature di incubazione diverse.

Dopo l'incubazione, contare tutte le colonie comparse sulla superficie dell'agar.

L'isolamento presuntivo di Bacillus cereus va confermato con ulteriori prove microbiologiche e biochimiche.

Ricostituire la fiala liofilizzata originale aggiungendo 6 mL di acqua distillata sterile.

Nota: ogni fiala è sufficiente per integrare 500 mL di Bacillus cereus Agar Base.

Controllo fisico-chimico

Controllo microbiologico

Ricostituire 1 fiala come indicato in Composizione; agitare e sciogliere completamente.

Distribuire in piastre il terreno completo, raffreddato a 50 °C.

Inoculo: intervallo pratico 100 ± 20 UFC, minimo 50 UFC (produttività) / 10⁴-10⁶ (selettività).

Aerobiosi. Incubazione a 35 ± 2 °C, lettura a 24-48 ore.

Controllo di sterilità

Aggiungere 5 mL del campione a 100 mL di TSB e a 100 mL di Thioglycollate.

Incubazione 48 ore a 30-35 °C e 48 ore a 20-25 °C: NESSUNA CRESCITA.

• ATLAS, R.M. & L.C. PARKS (1993) Handbook of Microbiological Media. CRC Press. London.
• CORRY, J.E.L., G.D.W. CURTIS & R.M. BAIRD. (2003) Handbook of Culture Media for Food Microbiology. Elsevier Sci. B.V. Amsterdam. The Netherlands.
• DOWNES, F.P. & K. ITO (2001) Compendium of methods for the microbiological examination of foods. 4th ed. APHA. Washington DC. USA.
• FIL-IDF 181:1998 Provisional Int. Standard. Dried Milk Products. Enumeration of Bacillus cereus - Most probable number technique.
• ISO 7932 Standard (2004) 3rd ed. Microbiology of food and animal feeding stuffs. Horizontal method for the enumeration of presumptive Bacillus cereus. Colony count technique at 30 °C.
• ISO 11133:2014/Amd 1:2018. Microbiology of food, animal feed and water. Preparation, production, storage and performance testing of culture media.
• ISO 21871 Standard (2006) Microbiology of food and animal feeding stuffs - Horizontal method for the determination of low numbers of presumptive Bacillus cereus - Most probable number technique and detection method.
• MOSSEL, D.A.A., KOOPMAN. M.J. & JONGERIUS, E. (1967) Enumeration of Bacillus cereus in foods. Appl. Microbiol. 15:650-653.
• PASCUAL ANDERSON, Mª R. (1992) Microbiología Alimentaria. Díaz de Santos, S.A. Madrid.