Supplementi e additivi
RPF Supplement ISO
Per l'isolamento selettivo degli stafilococchi coagulasi-positivi.
- Codice
- LC-6024
- Categoria
- Supplementi e additivi
- Formato
- 10 flaconcini, ciascuno per 100 mL di terreno
- Conservazione
- da 2 a 8 °C
- Validità minima garantita
- 12 mesi
- Ordine minimo
- 20 confezioni
Baird Parker Agar si usa per l'isolamento e la conta degli stafilococchi coagulasi-positivi negli alimenti e in altri materiali.
Caratteristiche principali
Applicazioni
Isolamento selettivo degli stafilococchi coagulasi-positivi.
Settori
Alimenti.
Preparazione
Ricostituire una fiala con 10 mL di acqua distillata sterile preriscaldata a 37 °C; aggiungere a 90 mL di Baird Parker Agar Base raffreddato a 45-50 °C.
Principio e uso
La norma ISO 6888-2 raccomanda l'aggiunta di Rabbit Plasma Fibrinogen (RPF) Supplement a Baird-Parker Agar Base (LC-1100), per ottenere Rabbit Plasma Fibrinogen (RPF) Agar, da usare per gli alimenti (come i formaggi a latte crudo e alcuni prodotti a base di carne cruda) che possono essere contaminati da stafilococchi che formano colonie non caratteristiche su Baird Parker Agar o da una flora di fondo che può mascherare le colonie cercate. Questo terreno va usato subito dopo la preparazione.
In Rabbit Plasma Fibrinogen Agar le colonie di stafilococchi sono piccole, nere o grigie, anche bianche, circondate da un alone di precipitazione che indica l'attività coagulasica. All'inizio dell'incubazione le colonie di Proteus possono avere caratteristiche fisiche simili a quelle delle colonie di Staphylococcus aureus coagulasi-positivo. Dopo 24 o 48 ore di incubazione, però, possono assumere un colore marrone che si espande e invade la piastra, e che permette di distinguerle dagli stafilococchi.
Specifiche tecniche
| Solubilità | Senza residui |
|---|---|
| Aspetto | Compressa liofilizzata |
| Colore del terreno disidratato | Non applicabile |
| Colore del terreno preparato | Da incolore a rosa pallido, leggermente opalescente |
| pH finale (25 °C) | Non applicabile |
| Conservazione | da 2 a 8 °C |
Formula
| Componente | Quantità per fiala |
|---|---|
| Plasma di coniglio | 2,5 mL |
| Tripsina | 2,5 mg |
| Tellurito di potassio | 2,5 mg |
| Fibrinogeno bovino | 0,38 g |
Formula tipica in g/L, adattata e/o integrata secondo necessità per soddisfare i criteri di prestazione.
Preparazione e uso
Preparazione
Ricostituire una fiala di RPF Supplement ISO con 10 mL di acqua distillata sterile (preriscaldata a 37 °C) e aggiungere in modo asettico a 90 mL di Baird Parker Agar Base (LC-1100) autoclavato e raffreddato a 45-50 °C. Omogeneizzare delicatamente e distribuire in piastre di Petri.
Istruzioni per l'uso
Conta degli stafilococchi coagulasi-positivi con la tecnica che usa Rabbit Plasma Fibrinogen Agar:
- Inoculare per inclusione 1 mL del campione liquido o 1 mL della sospensione iniziale. Inoculare anche la prima diluizione decimale.
- Incubare le piastre a una temperatura di 35-37 °C per 18-24 ore. Se necessario, reincubare per altre 18-24 ore alla stessa temperatura.
- Contare le colonie caratteristiche.
Controllo qualità
Secondo ISO 11133
Condizioni di incubazione: produttività, specificità (24 ± 2-48 ± 2 h / 37 ± 1 °C) / selettività (48 ± 2 h / 37 ± 1 °C).
Condizioni di inoculo: produttività quantitativa (100 ± 20 UFC, minimo 50 UFC) / selettività (10⁴-10⁶ UFC) / specificità (10³-10⁴ UFC).
Terreno di riferimento: TSA.
| Microrganismo | Specifica | Reazione caratteristica |
|---|---|---|
| Staphylococcus epidermidisATCC 12228 | Crescita | Colonie nere o grigie senza alone di opacità |
| Staphylococcus saprophyticusATCC 15305 | Crescita | Colonie nere o grigie senza alone di opacità |
| Escherichia coliATCC 25922 | Inibizione totale | |
| Staphylococcus aureusATCC 25923 | Crescita buona, > 50 % | Colonie nere o grigie con alone di opacità |
| Staphylococcus aureusATCC 6538 | Crescita buona, > 50 % | Colonie nere o grigie con alone di opacità |
Bibliografia
- Baird Parker, A.C. (1962). An improved diagnostic and selective medium for isolating coagulase-positive staphylococci. J. Appl. Bact. 25 (1): 12-19.
- Beckers N.J. et al (1984). Canad J. microbiol. 30: 470-474.
- ISO 6888-2. Enumeration of Staphylococcus aureus using RPF medium.
- ISO 6888-1. Microbiology of food and animal feeding stuffs - Horizontal method for the enumeration of coagulase-positive staphylococci (Staphylococcus aureus and other species) - Part 1: Technique using Baird-Parker agar medium.
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