Terreni pronti all'uso
DG 18 Metal Agar
Terreno solido differenziale a bassa attività dell'acqua usato per la determinazione dei funghi xerofili negli alimenti a basso contenuto di umidità e nell'aria degli ambienti interni, integrato con metalli in tracce.
- Codice
- LC-832
- Categoria
- Terreni pronti all'uso
- Formato
- 20 piastre da 90 mm
- Controllo qualità ISO 17025
- Sì
- Conservazione
- da 2 a 14 °C
- Validità minima garantita
- 1 mese
- Norme
- ISO 21527
Tra i terreni di coltura per i funghi xerofili, quelli che hanno avuto più successo sono quelli che contengono un agente che frena la crescita continua delle colonie dei funghi zigomiceti. Il dicloran (cloruro di diclorobenzalconio) e il rosa bengala sono due di questi inibitori.
Caratteristiche principali
Applicazioni
Conta selettiva e isolamento selettivo dei funghi xerofili.
Settori
Prodotti lattiero-caseari, alimenti.
Norme
ISO 21527.
Presentazione
20 piastre pronte da 90 mm con 21 ± 2 mL.
Descrizione e tecnica
Descrizione
La formulazione di DG18 Agar usata è quella proposta da Hocking e Pitt nel 1980 e contiene dicloran, che limita le dimensioni delle colonie fungine in modo più efficace del rosa bengala. Il cloramfenicolo inibisce la crescita batterica e la sua termostabilità permette di includerlo nel terreno prima della sterilizzazione.
L'aggiunta del 18 % (p/p) di glicerina dà al terreno un'attività dell'acqua (aw) di 0,955 senza causare nessuno dei problemi che di solito si presentano quando questa attività dell'acqua è ottenuta con cloruro di sodio o zucchero.
I metalli in tracce completano l'inibizione e la sporulazione.
Tecnica
Si raccomanda l'inoculo in massa per semina in superficie con un'ansa da inoculo, un tampone o distribuendo il campione con una spatola di Drigalski. Non usare mai un volume di inoculo superiore a 0,1 mL.
Secondo la tecnica normalizzata, le piastre vanno incubate a 22-25 °C, con letture parziali dopo 3 e 5 giorni e letture definitive dopo 7-8 giorni. I risultati si esprimono in UFC di xerofili per g o mL di campione alimentare o in UFC/m³ d'aria.
Le piastre di DG18 Agar in buste si conservano fino a una settimana a (5 ± 3) °C al buio. Per la sua attività dell'acqua estrema (aw = 0,955), le piastre vanno scartate se si sospetta qualsiasi tipo di disidratazione.
Ogni laboratorio deve valutare i risultati secondo le proprie specifiche.
L'isolamento presuntivo di qualsiasi xerofilo va confermato con ulteriori prove microbiologiche e biochimiche.
Presentazione
| Presentazione | 20 piastre pronte da 90 mm |
|---|---|
| Riempimento | 21 ± 2 mL |
| Confezione | 1 scatola con 2 confezioni da 10 piastre. Cellophane singolo. |
Composizione
| Componente | g |
|---|---|
| Peptone | 5,000 |
| Glucosio | 10,000 |
| Diidrogenofosfato di potassio | 1,000 |
| Solfato di magnesio | 0,500 |
| Dicloran | 0,002 |
| Cloramfenicolo | 0,100 |
| Agar | 15,000 |
| Glicerolo | 175 mL |
| Soluzione di metalli in tracce | 1,00 mL |
| Acqua distillata | 1000 mL |
(Volume finale: 1220 mL)
Controllo qualità
Controllo fisico-chimico
| Colore | Giallastro |
|---|---|
| pH | 5,6 ± 0,2 a 25 °C |
Controllo microbiologico
Inoculo: intervallo pratico 100 ± 20 UFC, minimo 50 UFC (produttività) / 10⁴-10⁶ (selettività).
Aerobiosi. Incubazione a 22,5 ± 2 °C fino a 5 giorni (muffe e lieviti).
| Microrganismo | Crescita |
|---|---|
| Aspergillus brasiliensisATCC 16404, WDCM 00053 | Buona |
| Escherichia coliATCC 25922, WDCM 00013 | Inibito |
| Bacillus subtilisATCC 6633, WDCM 00003 | Inibito |
| Candida albicansATCC 10231, WDCM 00054 | Buona |
Controllo di sterilità
Incubazione 48 ore a 30-35 °C e 48 ore a 20-25 °C: NESSUNA CRESCITA.
Controllo a 7 giorni dopo l'incubazione nelle stesse condizioni.
Bibliografia
- Atlas, R.M., et al. (1993) Handbook of Microbiological Media. CRC Press Inc. London.
- BEUCHAT, L.R. and C.A. HWANG (1995) Evaluation of modified dichloran 18% glycerol (DG18) agar for enumerating fungi in wheat flour. Int. J. Food Microbiol. 29:161-166.
- HOCKING, A.D. and J.I. PITT (1980) Dichloran-glycerol medium for enumeration of xerophilic fungi from low-moisture food. Appl. Environm. Microbiol. 39:488-492.
- ISO 11133:2014/Amd 1:2018. Microbiology of food, animal feed and water. Preparation, production, storage and performance testing of culture media.
- ISO 16000-17 Standard. (2008) Indoor air - Part 17: Detection and enumeration of moulds - Culture-based method.
- ISO 21527-2:2008. Microbiology of food and animal feeding stuffs - Horizontal method for the enumeration of yeasts and moulds - Part 2: Colony count technique in products with water activity less than or equal to 0.95.
- PITT, J.I., and A.D. HOCKING (1985) Fungi and Food Spoilage. Academic Press. Sydney.
- PITT, J.I., A.D. HOCKING and D.R. GLENN (1983) An improved medium for the detection of Aspergillus flavus and A. parasiticus. J. appl. Bacteriol. 54:109-114.
- SAMSON, R.A., E.S. HOEKSTRA, J.C. FRISVAD and O. FILTENBORG (2002) Introduction to the Food Borne Fungi. 6th ed. Centraalbureau voor Schimmelcultures. Utrecht.
- TAPIA de DAZA, M.S. and L.R. BEUCHAT. (1992) Suitability of modified dichloran glycerol (DG18) agar for enumerating unstressed and stressed xerophilic molds. Food Microbiol. 9:319-333.
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