KF Streptococcal Agar

Si usa per la conta su piastra degli enterococchi nei campioni di acqua e per determinare la presenza di Enterococcus faecalis nel latte e nei suoi derivati, oltre che in altri alimenti. L'isolamento e la conta degli enterococchi fecali si eseguono secondo APHA per l'esame delle acque (1998) e degli alimenti (1992).

La miscela di peptoni fornisce azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. L'estratto di lievito è fonte di vitamine, in particolare del gruppo B. Il maltosio e il lattosio sono i carboidrati fermentabili, come fonti di carbonio e di energia. Il glicerofosfato di sodio è un agente tampone. La sodio azide è un agente selettivo che inibisce i batteri Gram-negativi. Il cloruro di sodio fornisce gli elettroliti essenziali per il trasporto e l'equilibrio osmotico. L'agar batteriologico è l'agente solidificante.

L'aggiunta di TTC 1% Supplement (cloruro di 2,3,5-trifeniltetrazolio) permette agli enterococchi fecali di sviluppare un colore rosso, come risultato della riduzione del tetrazolio a formazano, un pigmento rosso insolubile, da parte delle cellule microbiche in crescita attiva.

Formula tipica in g/L, adattata e/o integrata secondo necessità per soddisfare i criteri di prestazione.

Preparazione

Sospendere 76,4 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. EVITARE DI SURRISCALDARE. NON STERILIZZARE IN AUTOCLAVE. Raffreddare a 45-50 °C e aggiungere in condizioni asettiche due fiale di TTC 1% Supplement (LC-6030). Omogeneizzare delicatamente e distribuire in piastre di Petri.

Istruzioni per l'uso

Metodo per inclusione:

1. Porre la diluizione scelta del campione in una piastra di Petri.
2. Versare in ogni piastra 15 mL di terreno preparato a 45 °C.
3. Mescolare accuratamente e lasciar solidificare l'agar.
4. Incubare le piastre capovolte a 35 ± 2 °C per 46-48 ore.

Tecnica di filtrazione su membrana:

1. Filtrare un volume adatto di campione attraverso una membrana sterile.
2. Porre il filtro a membrana, con il lato dell'inoculo verso l'alto, sull'agar solidificato nella piastra di Petri.
3. Incubare le piastre capovolte a 35 ± 2 °C per 46-48 ore.

Le colonie rosse o rosa si contano come enterococchi fecali, mentre le colonie arancioni, gialle, bianche o di altri colori non si contano. Il numero di enterococchi fecali si calcola per 100 mL di acqua.

• Ramos Cordova, Mario. "Manual of Methods of Milk and Lactose Analysis". Edition of Author, Mexico, D. F., 1976.
• Kenner, Clark and Kabler, Applied Microbiol. 9:15. 1961.
• Donnelly C.W., R.E. Bracket, D. Doores, W.H. Lee, and J. Lovett. 1992. Compendium of methods for the microbiological examination of foods, 3rd ed. American Public Health Association, Washington, D.C.