Malonate Phenylalanine Broth

Questo terreno è preparato secondo la formulazione sviluppata da Shaw e Clarke per differenziare i batteri enterici Gram-negativi in base alla loro capacità di utilizzare il malonato e di produrre acido piruvico dalla fenilalanina, che fa cambiare il colore del terreno dal verde al blu per effetto dell'indicatore di pH blu di bromotimolo. L'estratto di lievito fornisce nutrienti ai microrganismi, mentre due fosfati tamponano il terreno. Il blu di bromotimolo è l'indicatore di pH. Il cloruro di sodio mantiene l'equilibrio osmotico. I fosfati di potassio agiscono da sistema tampone. Il cloruro di sodio fornisce gli elettroliti essenziali per il trasporto e l'equilibrio osmotico.

Microrganismi come Klebsiella e Salmonella arizonae, capaci di utilizzare il malonato, producono una reazione alcalina e quindi fanno cambiare il colore del terreno da verde chiaro a blu scuro. Il colore del terreno resta verde chiaro se i microrganismi sono malonato-negativi. I membri del gruppo Proteus e Providencia sono in grado di formare acido piruvico dalla fenilalanina. Lo si può determinare aggiungendo a una coltura appena cresciuta alcune gocce di cloruro di ferro(II) al 10 % sciolto in acqua distillata acidificata. Si forma un colore verde scuro, dovuto alla produzione di acido piruvico dalla fenilalanina.

Formula tipica in g/L, adattata e/o integrata secondo necessità per soddisfare i criteri di prestazione.

Preparazione

Sospendere 11 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Distribuire in contenitori adatti e sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.

Istruzioni per l'uso

Inoculare e incubare a 35 ± 2 °C per 18-24 ore.

• Ewing, W.H., Davis, B.R. and Reavis, R.W. 1957. Phenylalanine and Malonate Media and Their Use in Enteric Bacteriology. The Public Health Laboratory, 15:153.