OGYE Agar ISO

Descrizione

Ha un'alta concentrazione di ossitetraciclina, che dà un'inibizione quasi totale dei batteri. Secondo ISO 13681 (1995), la combinazione con la gentamicina aumenta l'inibizione della crescita batterica nel terreno.

Tecnica

Raccogliere, diluire e preparare campioni e volumi secondo le specifiche, le direttive, le norme ufficiali e/o i risultati attesi.

Seminare le piastre per striscio o con il metodo a spirale.

Incubare le piastre non capovolte, in aerobiosi, a 20-25 °C fino a 5 giorni.

(A seconda del campione, delle specifiche, ecc., possono essere necessari tempi di incubazione più lunghi di quelli indicati sopra o temperature di incubazione diverse. Questo terreno si può inoculare direttamente o dopo un arricchimento in brodo.)

Dopo l'incubazione, contare tutte le colonie comparse sulla superficie dell'agar.

Ogni laboratorio deve valutare i risultati secondo le proprie specifiche.

LC-4664 e LC-4665, flaconi

ISO 7954 raccomanda come antibiotico il cloramfenicolo o l'ossitetraciclina.

Questi antibiotici, però, non inibiscono a sufficienza i microrganismi Gram-negativi presenti nella carne, soprattutto nella materia prima. In caso di forte contaminazione, per ottenere l'inibizione è necessario aggiungere gentamicina.

La combinazione di cloramfenicolo e gentamicina inibisce alcuni tipi di lieviti. L'antibiotico indicato in alternativa, l'ossitetraciclina, è l'antibiotico di scelta.

Per l'uso, il contenuto del flacone va versato in piastre. Il terreno di coltura va fuso secondo le istruzioni del produttore, a bagnomaria o nel forno a microonde. Non applicare mai calore diretto per fondere un terreno. Le temperature e i tempi di fusione dipendono dalla forma del contenitore, dal volume di terreno e dalla fonte di calore. Prima di fondere qualsiasi terreno, allentare il tappo a vite del contenitore per evitare che si rompa. Il terreno va fuso una sola volta e poi usato. I terreni con agar non vanno fusi più volte, perché le loro caratteristiche cambiano a ogni nuova fusione. Il surriscaldamento va evitato quanto il riscaldamento prolungato, soprattutto per i terreni a pH acido o alcalino. Una volta fuso il terreno, versare le piastre con tecniche asettiche.

Per l'inoculo seguire i metodi standard del laboratorio o le norme applicabili: metodo di semina a spirale, semina per striscio, metodi ecometrici, serie di diluizioni o spatolamento.

Controllo fisico-chimico

Controllo microbiologico

LC-851: semina a spirale: intervallo pratico 100 ± 20 UFC, minimo 50 UFC (produttività) / 10⁴-10⁶ UFC (selettività).

LC-4664 e LC-4665: fusione - piastre per inclusione - inoculo: intervallo pratico 100 ± 20 UFC, minimo 50 UFC (produttività) / 10⁴-10⁶ UFC (selettività).

LC-851 e LC-4665: controllo microbiologico secondo ISO 11133:2014/Amd 1:2018.

Aerobiosi. Incubazione a 22,5 ± 2,5 °C. Lettura a 24-72 h per i batteri e a 3-5 giorni per lieviti e muffe.

Controllo di sterilità

Incubazione 48 ore a 30-35 °C e 48 ore a 20-25 °C: NESSUNA CRESCITA.

Controllo a 7 giorni dopo l'incubazione nelle stesse condizioni.

• DOWNES, F.P. & K. ITO (2001) Compendium of methods for the microbiological examination of foods. APHA. Washington DC. USA.
• ISO 11133:2014/Amd 1:2018. Microbiology of food, animal feed and water. Preparation, production, storage and performance testing of culture media.
• ISO 13681 Standard (1995) Enumeration of Yeasts and Moulds. Colony Count Technique.
• MacFADDIN, J.F. (1985) Media for isolation-cultivation-identification-maintenance of medical bacteria. William & Wilkins. Baltimore. MD. USA.
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• MOSSEL, D.A.A., A.M.C. KLEYNEN-SEMMELING, H.M. VINCENTIE, H. BEERENS & M. CATSARAS (1970) Oxytetracycline-Glucose-Yeast Extract Agar for selective enumeration of moulds and yeasts in foods and clinical material. J. Appl. Bacteriol. 33:454-457.
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