Terreni disidratati
Tetrathionate Broth Base 500 g
Per l'arricchimento selettivo delle specie di Salmonella da alimenti, acque e altri materiali.
- Codice
- LC-1114
- Categoria
- Terreni disidratati
- Formato
- 500 g
- Conservazione
- da 2 a 25 °C
- Validità minima garantita
- 15 mesi
- Norme
- BAMUSP
Tetrathionate Broth Base, con la soluzione di iodio-ioduro, si usa come arricchimento selettivo per la coltivazione delle specie di Salmonella che possono essere presenti in numero ridotto o essere state danneggiate durante la lavorazione degli alimenti, e che competono con altri microrganismi e con la flora intestinale. Anche se le cellule danneggiate possono non formare colonie sui terreni selettivi, possono causare malattie se ingerite. Questa formulazione è conforme alla Farmacopea degli Stati Uniti (USP).
Caratteristiche principali
Arricchimento selettivo di Salmonella.
Alimenti.
BAM, USP.
46 g in un litro di acqua distillata; far bollire per un minuto, evitare di surriscaldare, non sterilizzare in autoclave.
Principio e uso
Il tetrationato si forma dalla reazione dello iodio con il tiosolfato di sodio. Questa combinazione (tiosolfato di sodio e tetrationato) sopprime gli organismi intestinali commensali. Gli organismi che hanno l'enzima tetrationato reduttasi, come Salmonella, proliferano in questo terreno. Anche Proteus contiene questo enzima, ma la sua crescita si può ridurre al minimo aggiungendo 4 mg/L di novobiocina prima di aggiungere la soluzione di iodio. Il peptone fornisce azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. I sali biliari sono inibitori di altri organismi Gram-positivi. Il carbonato di calcio neutralizza e assorbe i metaboliti tossici.
Specifiche tecniche
| Solubilità | Quasi limpido, con un precipitato bianco denso |
|---|---|
| Aspetto | Polvere fine |
| Colore del terreno disidratato | Tostato |
| Colore del terreno preparato | Bianco latte |
| pH finale (25 °C) | 8,4 ± 0,2 |
| Quantità per litro | 46 g |
| Conservazione | da 2 a 25 °C |
Formula
| Componente | g/L |
|---|---|
| Sali biliari | 1 |
| Carbonato di calcio | 10 |
| Miscela di peptoni | 5 |
| Tiosolfato di sodio | 30 |
Formula tipica in g/L, adattata e/o integrata secondo necessità per soddisfare i criteri di prestazione.
Preparazione e uso
Preparazione
Sospendere 46 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. EVITARE DI SURRISCALDARE. NON STERILIZZARE IN AUTOCLAVE. Raffreddare a 45-50 °C e aggiungere al terreno in condizioni asettiche 20 mL per litro di una soluzione di iodio, lo stesso giorno dell'uso. Omogeneizzare delicatamente e distribuire in contenitori sterili. Preparare la soluzione di iodio-ioduro sciogliendo 6 g di cristalli di iodio e 5 g di ioduro di potassio in 20 mL di acqua distillata. Distribuire 10 mL in provette, agitando continuamente la beuta per mantenere l'omogeneità.
Istruzioni per l'uso
- Inoculare ogni provetta da 10 mL con 1-2 g di campione (acque reflue, ecc.) e incubare a 35 ± 2 °C per 18-24 ore.
- La crescita è indicata dalla torbidità del terreno.
- Dopo l'incubazione, trapiantare su terreni selettivi in piastra per Salmonella, come MacConkey Agar (LC-1052), Bismuth Sulfite Agar (LC-1011), Desoxycholate Agar (LC-1020), Brilliant Green Agar (LC-1078), XLD Agar (LC-1274) o Hektoen Enteric Agar (LC-1030), e incubare a 35 ± 2 °C per 18-24 ore.
Controllo qualità
Condizioni di incubazione: 35 ± 2 °C / 18-24 h.
| Microrganismo | Specifica | Reazione caratteristica |
|---|---|---|
| Salmonella typhimuriumATCC 14028 + Escherichia coli ATCC 8739 + Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 | > 10 colonie su XLD o altro terreno | Colonie con centro nero e una zona chiara trasparente di colore rossastro, dovuta al viraggio di colore del terreno |
| Salmonella enteritidisATCC 13076 + Escherichia coli ATCC 8739 + Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 | > 10 colonie su XLD o altro terreno | Colonie con centro nero e una zona chiara trasparente di colore rossastro, dovuta al viraggio di colore del terreno |
| Enterococcus faecalisATCC 29212 | < 10 colonie su TSA | |
| Escherichia coliATCC 8739 | Inibizione parziale, < 100 colonie su TSA |
Bibliografia
- American Public Health Association Recommended Methods for the Microbiological Examination of Foods, APHA, Inc. New York, 1958.
- American Public Health Association Standard Methods for the Examination of Dairy products. Eleventh Edition, APHA, Inc. New York, 1960.
- Kauffmann 1930. Zentralbl. Bacteriol. Parasitenkd. Infektionskr. Hyg. Abt. Orig. 113-148.
- United States Pharmacopeial Convention, Inc. 2001. The United States pharmacopeia 25/The national formulary 20 - 2002. United States Pharmacopeial Convention, Inc., Rockville, Md.
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