Terreni disidratati
Tryptone Bile Salts Agar
Per la rilevazione e la conta di E. coli e di altri coliformi nelle acque, con la tecnica di filtrazione su membrana.
- Codice
- LC-1013
- Categoria
- Terreni disidratati
- Formato
- 500 g
- Conservazione
- da 2 a 25 °C
- Validità minima garantita
- 15 mesi
Tryptone Bile Salts Agar si usa nel test rapido per la rilevazione e la conta di Escherichia coli e di altri coliformi negli alimenti e nelle acque con la tecnica di filtrazione su membrana.
Caratteristiche principali
Rilevazione e conta selettiva di Escherichia coli.
Acque.
36,5 g in un litro di acqua distillata; far bollire per un minuto, sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.
Principio e uso
Il triptone fornisce azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. I sali biliari sono inibitori dei microrganismi Gram-positivi e sopprimono i batteri coliformi. L'agar batteriologico è l'agente solidificante.
La presenza fecale e il suo livello sono un fattore importante nella valutazione di una massa d'acqua e del rischio di infezione che essa comporta per la salute umana. L'analisi dei campioni di acqua per rilevare E. coli, che di solito si trova nel tratto intestinale dell'uomo e degli altri animali a sangue caldo, dà un'indicazione di questo tipo di contaminazione.
Questo terreno è raccomandato per il metodo del test rapido, basato sul fatto che il 99 % dei ceppi di Escherichia produce indolo dal triptofano a 44 °C quando cresce con la tecnica di filtrazione su membrana.
Specifiche tecniche
| Solubilità | Senza residui |
|---|---|
| Aspetto | Polvere fine |
| Colore del terreno disidratato | Beige |
| Colore del terreno preparato | Ambra, leggermente opalescente |
| pH finale (25 °C) | 7,2 ± 0,1 |
| Quantità per litro | 36,5 g |
| Conservazione | da 2 a 25 °C |
Formula
| Componente | g/L |
|---|---|
| Agar batteriologico | 15 |
| Sali biliari | 1,5 |
| Triptone | 20 |
Formula tipica in g/L, adattata e/o integrata secondo necessità per soddisfare i criteri di prestazione.
Preparazione e uso
Preparazione
Sospendere 36,5 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti. Raffreddare a 45-50 °C, mescolare bene e distribuire in piastre.
Istruzioni per l'uso
- Incubare la membrana filtrante a 36 ± 2 °C per 4-5 ore su Tryptone Soy Agar (LC-1138).
- Trasferire la membrana filtrante su Tryptone Bile Salts Agar e incubare a 44 ± 0,5 °C per 19-20 ore.
- Se si desidera, i due terreni agarizzati si possono combinare in doppio strato in una piastra di Petri. In questo caso conviene porre la membrana su una piastra a doppio strato di TSA (LC-1138) e TBA preparata da poco. Incubare a 36 ± 2 °C per 4-5 ore e incubare di nuovo a 44 ± 0,5 °C per 19-20 ore.
- Eseguire il test dell'indolo: tutti i ceppi indolo-positivi che danno colonie rosse quando colorati con il reattivo per l'indolo sono considerati E. coli.
Controllo qualità
Condizioni di incubazione: 44 ± 0,5 °C / 19-20 h.
| Microrganismo | Specifica | Reazione caratteristica |
|---|---|---|
| Escherichia coliATCC 25922 | Crescita buona | Colonie rosse, indolo (+) |
| Enterococcus faecalisATCC 29122 | Inibizione |
Bibliografia
- International Standard ISO 9308-1 Water quality. Detection and enumeration of Escherichia coli and coliform bacteria. Part 1: Membrane filtration method.
- Sahidi S.A. and Ferguson A.R. (1971) Appl. Microbiol., 21 500-506.
- Harmon S.M., Kauttar D.A. and Peeler J.T. (1971) Appl. Microbiol. 21. 922-927.
- Hauschild A.H.W and Hilsheimar R. (1973) Appl. Microbiol. 27. 78-82.
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