Terreni disidratati
Tryptose Soy Agar ISO
Per la rilevazione e la conta di E. coli nelle acque.
- Codice
- LC-1138
- Categoria
- Terreni disidratati
- Formato
- 500 g
- Conservazione
- da 2 a 25 °C
- Validità minima garantita
- 15 mesi
- Norme
- ISO 9308
Tryptone Soy Agar si usa per la prova rapida e standard di rilevazione e conta di E. coli e degli altri coliformi con la tecnica di filtrazione su membrana, come indicato dalla norma ISO 9308-1.
Caratteristiche principali
Rilevazione e conta non selettiva dei coliformi e di Escherichia coli.
Acque.
ISO 9308.
40 g in un litro di acqua distillata; far bollire per un minuto, sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.
Principio e uso
È anche un terreno solido per uso generale, particolarmente utile per l'isolamento, le prove di sensibilità e la determinazione dell'emolisi con i microrganismi esigenti, perché non contiene zuccheri. Un altro uso di Tryptone Soy Agar è la prova dell'ossidasi secondo il metodo tradizionale descritto nella norma ISO 9308-1.
I peptoni di caseina e di soia forniscono azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. Il cloruro di sodio mantiene l'equilibrio osmotico e l'agar batteriologico è l'agente solidificante.
Specifiche tecniche
| Solubilità | Senza residui |
|---|---|
| Aspetto | Polvere fine |
| Colore del terreno disidratato | Beige |
| Colore del terreno preparato | Ambra, leggermente opalescente |
| pH finale (25 °C) | 7,2 ± 0,1 |
| Quantità per litro | 40 g |
| Conservazione | da 2 a 25 °C |
Formula
| Componente | g/L |
|---|---|
| Agar batteriologico | 15 |
| Cloruro di sodio | 5 |
| Peptone di soia | 5 |
| Digerito triptico di caseina | 15 |
Preparazione e uso
Preparazione
Sospendere 40 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti. Raffreddare a 50 °C, mescolare bene e distribuire in piastre.
Secondo ISO 9308
Per la conta di E. coli e degli altri batteri coliformi secondo ISO 9308:
- Filtrare 100 mL del campione su una membrana.
- Porre il filtro su una piastra di Chromogenic E. coli Coliforms Agar (CCA) (LC-2080).
- Capovolgere la piastra e incubare a 36 ± 2 °C per 21 ± 3 ore.
- Contare le colonie beta-D-galattosidasi-positive (da rosa a rosse) come batteri coliformi presuntivi diversi da E. coli.
Per evitare possibili risultati falsi positivi dovuti a batteri ossidasi-positivi come Aeromonas spp., confermare le colonie batteriche con la prova dell'ossidasi. I coliformi saranno quelli con risultato ossidasi-negativo.
- Contare come E. coli le colonie positive alla beta-D-galattosidasi e alla beta-D-glucuronidasi (da blu scuro a viola).
- Se le colonie non sono cresciute abbastanza per eseguire la prova dell'ossidasi con colonie pure, è necessario trapiantarle in un terreno non selettivo come Tryptone Soy Agar (TSA).
- Incubare le piastre capovolte a 36 ± 2 °C per 21 ± 3 ore.
La conta totale dei coliformi è la somma delle colonie ossidasi-negative, delle colonie beta-D-galattosidasi-positive (da rosa a rosse) e di tutte le colonie da blu scuro a viola.
Controllo qualità
Condizioni di incubazione: 36 ± 2 °C / 21 ± 3 h.
| Microrganismo | Specifica |
|---|---|
| Klebsiella pneumoniaeATCC 13833 | Crescita buona |
| Escherichia coliATCC 25922 | Crescita buona |
Bibliografia
- ISO 9308-1 Water quality. Detection and enumeration of Escherichia coli and coliform bacteria. Part 1: Membrane filtration method.
- Regulation water quality - Detection and count of Escherichia coli and coliform bacteria. Anon. 1987 J. Food Microbiol., 5: 291-296.
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