Terreni disidratati
PPLO Agar Base w/o Crystal Violet
Per l'isolamento e la coltura dei microrganismi PPLO: Mycoplasma.
- Codice
- LC-1140
- Categoria
- Terreni disidratati
- Formato
- 500 g
- Conservazione
- da 2 a 25 °C
- Validità minima garantita
- 15 mesi
PPLO Agar Base w/o Crystal Violet si usa nello studio delle esigenze di crescita di Mycoplasma, oltre che per l'identificazione e la coltivazione di questo microrganismo. PPLO sta per Pleuro Pneumonia-Like Organisms ed è stato descritto da Morton, Smith e Leberman.
Caratteristiche principali
Applicazioni
Arricchimento e isolamento selettivi di Mycoplasma.
Preparazione
35 g in un litro di acqua distillata; far bollire per un minuto, sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.
Principio e uso
Il peptone e l'infuso di cuore di manzo forniscono i nutrienti per la crescita: azoto, vitamine, minerali e aminoacidi, mentre il cloruro di sodio fornisce l'equilibrio osmotico. Il cristal violetto non è incluso in questa formula perché inibisce alcuni Mycoplasma. L'agar batteriologico è l'agente solidificante.
Le colonie di PPLO hanno forma rotonda e un centro denso con una periferia meno densa, che sull'agar dà un aspetto "a uovo fritto".
Specifiche tecniche
| Solubilità | Senza residui |
|---|---|
| Aspetto | Polvere fine |
| Colore del terreno disidratato | Beige |
| Colore del terreno preparato | Ambra, leggermente opalescente |
| pH finale (25 °C) | 7,8 ± 0,2 |
| Quantità per litro | 35 g |
| Conservazione | da 2 a 25 °C |
Formula
| Componente | g/L |
|---|---|
| Agar batteriologico | 14 |
| Infuso di cuore di manzo | 6 |
| Peptone | 10 |
| Cloruro di sodio | 5 |
Formula tipica in g/L, adattata e/o integrata secondo necessità per soddisfare i criteri di prestazione.
Preparazione e uso
Preparazione
Sospendere 35 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti. Raffreddare a 45-50 °C e, se si desidera, aggiungere in condizioni asettiche l'1 % di frazione sierica o il 25 % di liquido ascitico. Omogeneizzare delicatamente e distribuire in piastre di Petri.
Istruzioni per l'uso
Metodo di inoculo:
- Far crescere il microrganismo in PPLO Broth Base w/o Crystal Violet (LC-1262).
- Inoculare il campione in esame in PPLO Agar w/o Crystal Violet con 0,1 mL di diluizioni seriali. Usare il metodo per inclusione o la tecnica di inoculo con tampone.
- Incubare a 35 ± 2 °C con il 5-10 % di CO₂, per un massimo di 7 giorni.
Controllo qualità
La prova microbiologica deve essere eseguita dal laboratorio dell'utilizzatore finale.
Bibliografia
- Adler, H.E. and AJ Da Massa. 1967 Use of formalinized Mycoplasma gallisepticum antigens and chicken erythrocytes in hemagglutination and hemagglutination-inhibition studies. Appl. Microbiol 15:245-248.
- Morton HE and JG Lecce. 1953. Selective action of thallium acetate and crystal violet for pleuropneumonia like organisms of human origin. J. Bacteriol 66:646-649.
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