Violet Red Bile Agar With Glucose and Lactose (VRBLG) USP

Il digerito pancreatico di gelatina fornisce azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. L'estratto di lievito è fonte di vitamine, in particolare del gruppo B. Il lattosio e il glucosio sono i carboidrati fonte di energia. I sali biliari e il cristal violetto inibiscono i batteri Gram-positivi. Il rosso neutro è un indicatore di pH. Il cloruro di sodio fornisce gli elettroliti essenziali per il trasporto e l'equilibrio osmotico. L'agar batteriologico è l'agente solidificante.

Preparazione

Sospendere 51,5 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Raffreddare a 45 °C e usare subito. Il terreno si può anche distribuire e sterilizzare in autoclave a 118 °C per 15 minuti.

Istruzioni per l'uso

Per la rilevazione delle Enterobacteriaceae:

1. Preparare il campione con Lactose Broth (LC-1206), omogeneizzare e incubare a 35 ± 2 °C per 2-5 ore, tempo sufficiente a rivitalizzare i batteri ma non a farli crescere.
2. Dopo aver mescolato con Mossel EE Broth (LC-1202) in rapporto 1:100 mL e incubato a 35 ± 2 °C per 18-24 ore, trapiantare su VRBLG Agar per ottenere l'isolamento selettivo.
3. Incubare a 35 ± 2 °C per 18-24 ore.

Per la conta delle Enterobacteriaceae:

1. Inoculare il campione in Mossel EE Broth (diluizioni 0,1, 0,01, 0,001 mL) e incubare a 35 ± 2 °C per 24-48 ore.
2. Trapiantare su piastre di VRBLG Agar per ottenere l'isolamento selettivo.
3. Incubare a 35 ± 2 °C per 18-24 ore.
4. La crescita di colonie rosse ben sviluppate di batteri Gram-negativi costituisce un risultato positivo.
5. Consultare i riferimenti appropriati per ulteriori prove di identificazione.

• European Pharmacopoeia 6.0
• Hitchins, A.D., P.A. Hartman, and E.C.D. Todd. 1992. Coliforms - Escherichia coli and its toxins, p. 325-369. In Vanderzant, C., and D.F. Splittstoesser (ed.) Compendium of methods for the microbiological examination of foods, 3rd ed. American Public Health Association, Washington, DC.