Endo LES Agar Base

Come Endo Agar, usa la fucsina per differenziare i batteri che fermentano il lattosio da quelli che non lo fermentano. La produzione di acetaldeide da parte dei microrganismi che fermentano il lattosio, come Escherichia coli, produce colonie rosse caratteristiche e una zona circostante rossa, evidenziata dalla sua reazione con il solfito di sodio in presenza di fucsina. I microrganismi che non fermentano il lattosio formano colonie incolori e trasparenti.

I peptoni di caseina e di carne e il triptosio forniscono azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. L'estratto di lievito è fonte di vitamine, in particolare del gruppo B. Il lattosio è il carboidrato fermentabile che fornisce carbonio ed energia. I fosfati di potassio agiscono da sistema tampone. Il desossicolato di sodio inibisce la crescita dei batteri Gram-positivi. Il lauril solfato di sodio inibisce parzialmente i microrganismi diversi dai coliformi. Il cloruro di sodio fornisce gli elettroliti essenziali per il trasporto e l'equilibrio osmotico. L'agar batteriologico è l'agente solidificante.

Nota: la fucsina basica è un potenziale cancerogeno e vanno prese precauzioni per evitare l'inalazione della polvere del colorante e il contatto con la pelle.

Preparazione

Sospendere 50,25 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Aggiungere 8 mL di una soluzione alcolica al 10 % (p/v) di fucsina basica in etanolo al 95 %. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti. Raffreddare a 50 °C, mescolare bene e distribuire in piastre.

Istruzioni per l'uso

Usare la tecnica di filtrazione su membrana per inoculare i filtri e preincubarli su tamponi assorbenti saturati di Lauryl Sulfate Broth (LC-1310) a 35 ± 2 °C per 1,5-2,5 ore. Trasferire i filtri su piastre di Endo LES Agar Base e incubare a 35 ± 2 °C per 18-24 ore.

I fermentatori rapidi del lattosio producono colonie rosse con riflesso metallico. I fermentatori lenti del lattosio producono colonie rosse. I non fermentatori del lattosio producono colonie incolori.

Attenzione: con l'esposizione all'ossigeno il terreno in piastra diventa gradualmente rosso per l'ossidazione del solfito e quindi non si può più usare. Il terreno ossidato (rosso molto intenso) non va usato, perché la produttività del terreno diminuisce.

• APHA (1980) Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater. 15th Ed. Washington, D.C.