VP Semisolid Medium

Il triptone e il peptone di soia forniscono azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. L'estratto di lievito è la frazione idrosolubile del lievito idrolizzato ed è fonte di vitamine, in particolare del gruppo B. Il destrosio è il carboidrato fermentabile che fornisce carbonio ed energia. Il cloruro di sodio fornisce gli elettroliti essenziali per il trasporto e l'equilibrio osmotico. L'agar batteriologico è l'agente solidificante.

Voges e Proskauer descrissero nel 1898 una colorazione rossa fluorescente che compariva in alcune colture dopo l'aggiunta di gocce di soluzione di KOH. In seguito si ipotizzò che questa reazione fosse dovuta all'ossidazione dell'acetilmetilcarbinolo a diacetile, che reagiva con il peptone del terreno dando un colore rosso. I batteri Enterobacter ossidano l'acetilmetilcarbinolo e danno una colorazione rossa, a differenza di Escherichia coli, che non lo fa.

Preparazione

Sospendere 31 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Distribuire e sterilizzare a 121 °C per 15 minuti.

Istruzioni per l'uso

1. Inoculare e incubare il terreno fino a 5 giorni.
2. Eseguire la prova di Voges-Proskauer (VP):

A 5 mL di terreno inoculato e incubato fino a 5 giorni, aggiungere 0,6 mL di alpha-naftolo al 5 % in etanolo assoluto e 0,2 mL di idrossido di sodio al 40 % e agitare di tanto in tanto per 15 minuti. La provetta si può tenere a temperatura ambiente o incubare a 35 ± 2 °C. È importante aggiungere i reagenti in sequenza. Una prova positiva è indicata dalla comparsa di un colore da rosa tenue a rosso. La prova non va letta dopo un'ora, perché dopo questo tempo le colture VP negative possono sviluppare un colore ramato.

• Clark and Lubs. J. Inf. Dis. 17:160. 1955.
• Ewing. Enterobacteriaceae. USPHS.
• Edwards and Ewing. Identification of Enterobacteriaceae Burgess Publ. Co. Minneapolis, Minn., 1962.
• Voges, O., and B. Proskauer. 1898. Z. Hyg. 28: 20-22.
• Association of Official Analytical Chemists. 1995. Bacteriological analytical manual, 8th ed. AOAC International, Gaithersburg, MD.