LIM Medium (Lysine, Indole, Motility Medium)

Il peptone fornisce azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. L'estratto di lievito è fonte di vitamine, in particolare del gruppo B. Il destrosio è il carboidrato fermentabile. Il porpora di bromocresolo è l'indicatore di pH. La lisina si aggiunge per rilevare la produzione dell'enzima specifico. L'aggiunta di triptofano al terreno permette di eseguire la prova dell'indolo. La bassa concentrazione di agar batteriologico serve per la rilevazione della motilità.

Preparazione

Sospendere 30,02 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Distribuire in provette e sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.

Istruzioni per l'uso

1. Inoculare per infissione il terreno LIM e incubare in atmosfera aerobica per 24 ore a 37 ± 2 °C.
2. Leggere le reazioni di motilità e della lisina decarbossilasi prima di aggiungere Kovac's Reagent (LC-5205) per la prova dell'indolo.
3. La motilità è indicata dalla torbidità nel terreno o da una crescita che si estende lontano dalla linea di inoculo.
4. La decarbossilazione della lisina è indicata da un colore porpora nel terreno. Una reazione negativa della lisina produce un colore giallo sul fondo della provetta.
5. La prova dell'indolo si esegue aggiungendo qualche goccia di Kovac's Reagent (LC-5205). Una prova positiva è indicata dalla formazione di un colore da rosa a rosso nello strato del reagente dopo qualche minuto.
6. Se la reazione dell'indolo è negativa, incubare per altre 24 ore.
7. Confrontare i risultati con una provetta non inoculata.

• Igarashi H. et al. (1969) A new differential medium for enteric pathogens, lysine-indole-motility (LIM) medium.