Terreni pronti all'uso
Baird Parker RPF Base Agar ISO
Terreno di coltura selettivo per la conta degli stafilococchi coagulasi-positivi da campioni di vario tipo, secondo la norma ISO 6888-2.
- Codice
- LC-4669
- Categoria
- Terreni pronti all'uso
- Formato
- 10 flaconi da 90 mL
- Controllo qualità ISO 17025
- Sì
- Conservazione
- da 8 a 25 °C
- Validità minima garantita
- 4 mesi
- Norme
- ISO 22718ISO 6888
Terreni pronti all'uso in piastre, piastre a contatto, provette, flaconi e sacche.
Caratteristiche principali
Isolamento selettivo degli stafilococchi coagulasi-positivi.
Alimenti.
ISO 22718, ISO 6888.
10 flaconi pronti da 125 mL con 90 ± 3 mL.
Descrizione e tecnica
Raccogliere, diluire e preparare campioni e volumi secondo le specifiche, le direttive, le norme ufficiali e/o i risultati attesi.
Fondere il terreno contenuto nei flaconi a bagnomaria (100 °C) o nel forno a microonde, evitando di surriscaldarlo, prima di versarlo in piastre di Petri una volta raffreddato a 40-45 °C, dopo avervi aggiunto una fiala sterile ricostituita di supplemento RPF (1 fiala / 90 mL di terreno base). Non usare questa base con il supplemento Egg Yolk Tellurite.
Una volta solidificato su una superficie piana, seminare le piastre per striscio o con il metodo a spirale.
Incubare le piastre non capovolte, in aerobiosi, a 37 ± 1 °C per 24-48 h.
Dopo l'incubazione, contare tutte le colonie comparse sulla superficie dell'agar. S. aureus forma colonie nere brillanti (riduzione del tellurito), sempre circondate da un alone di fibrina.
Ogni laboratorio deve valutare i risultati secondo le proprie specifiche. L'isolamento presuntivo di S. aureus va confermato con ulteriori prove microbiologiche e biochimiche.
Calcolare la carica microbica totale per mL di campione moltiplicando il numero medio di colonie per piastra per l'inverso del fattore di diluizione, se è stato seminato un campione diluito. Riportare i risultati come unità formanti colonia (UFC) per mL o per g, insieme al tempo e alla temperatura di incubazione.
Presentazione
| Presentazione | 10 flaconi pronti da 125 mL |
|---|---|
| Riempimento | 90 ± 3 mL |
| Confezione | 1 scatola con 10 flaconi da 125 mL. Tappo metallico non perforabile. |
Composizione
| Componente | g/L |
|---|---|
| Peptone di caseina | 10,0 |
| Piruvato di sodio | 10,0 |
| Glicina | 12,0 |
| Estratto di carne | 5,00 |
| Cloruro di litio | 5,00 |
| Estratto di lievito | 1,00 |
| Agar | 15,0 |
Controllo qualità
Controllo fisico-chimico
| Colore | Giallo |
|---|---|
| pH | 7,2 ± 0,2 a 25 °C |
Controllo microbiologico
Prima dell'aggiunta di 1 fiala ricostituita di supplemento RPF.
Inoculo: intervallo pratico 100 ± 20 UFC, minimo 50 UFC (produttività) / 10⁴-10⁶ (selettività).
Aerobiosi. Incubazione a 37 ± 1 °C, lettura dopo 24-48 ± 2 h.
| Microrganismo | Crescita |
|---|---|
| Escherichia coliATCC 8739, WDCM 00012 | Inibito |
| Stph. aureusATCC 25923, WDCM 00034 | Buona, ≥ 50 %. Colonie nere/grigie con alone di opacità |
| Stph. saprophyticusATCC 15305, WDCM 00159 | Colonie nere/grigie senza alone di opacità |
| Stph. epidermidisATCC 12228, WDCM 00036 | Colonie nere/grigie senza alone di opacità |
Controllo microbiologico secondo ISO 11133:2014.
Controllo di sterilità
Incubazione 48 ore a 30-35 °C e 48 ore a 20-25 °C: NESSUNA CRESCITA.
Controllo a 7 giorni dopo l'incubazione nelle stesse condizioni.
Bibliografia
- ATLAS R.M. & L.C. PARKS (1993) Handbook of Microbiological Media. CRC Press. London.
- BAIRD-PARKER, A.C. (1962) An improved diagnostic and selective medium for isolating coagulase-positive staphylococci. J. Appl. Bact. 25:12.
- COLIPA (1997) Guidelines on Microbial Quality Management (MQM). Brussels.
- DOWNES, F.P. & K. ITO (2001) Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods. 4th ed. APHA. Washington. USA.
- EUROPEAN PHARMACOPOEIA (2007) 5th ed. Suppl. 5.6 § 2.6.13 Microbiological examination of non-sterile products. EDQM. Council of Europe. Strasbourg.
- FIL-IDF 60:2001 Standard. Lait et produits à base de lait - Detection des staphylocoques à coagulase positive - Technique du nombre le plus probable. Brussels.
- ISO 5944:2001 Standard. Milk and Milk based products - Detection of coagulase positive staphylococci - MPN Technique. Geneva.
- ISO 6888-1:1999/Amd 2:2018. Standard. Microbiology of food and animal feeding stuffs - Horizontal method for the enumeration of coagulase-positive staphylococci (Staphylococcus aureus and other species) - Part 1 Technique using Baird-Parker Agar medium. Amendment 2: Inclusion of an alternative confirmation test using RPFA stab method.
- ISO 6888-2:1999 Standard. Microbiology of food and animal feeding stuffs - Horizontal method for the enumeration of coagulase-positive staphylococci - Part 1 Technique using rabbit plasma fibrinogen agar medium. Geneva.
- ISO 11133:2014/Amd 1:2018. Microbiology of food, animal feed and water. Preparation, production, storage and performance testing of culture media.
- ISO 22718 Standard (2015). Cosmetics - Microbiology - Detection of Staphylococcus aureus.
- USP 31 - NF 26 (2008) <61> Microbial Limit Tests. US Pharmacopeial Conv. Inc. Rockville. MD. USA.
- ZANGERL, P. & H. ASPERGER (2003) Media used in the detection and enumeration of Staphylococcus aureus. In Handbook.
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