Terreni pronti all'uso
Cetrimide Agar. Irradiated. EP/USP/ISO
Terreno di coltura solido per l'isolamento selettivo di Pseudomonas aeruginosa, secondo il metodo armonizzato delle farmacopee.
- Codice
- LC-791
- Categoria
- Terreni pronti all'uso
- Formato
- 20 piastre da 90 mm
- Controllo qualità ISO 17025
- Sì
- Conservazione
- da 15 a 25 °C
- Validità minima garantita
- 2 mesi
- Norme
- Farmacopea Europea
Cetrimide Agar si basa sulla resistenza dei ceppi di P. aeruginosa ai composti di ammonio quaternario (QAC). Con il bromuro di cetiltrimetilammonio si è ottenuta una crescita a concentrazioni di 1 g/L, ma molto scarsa e lenta.
Caratteristiche principali
Applicazioni
Isolamento selettivo di Pseudomonas aeruginosa.
Settori
Clinico, controllo qualità del prodotto finito, farmaceutico e veterinario.
Norme
Farmacopea Europea.
Presentazione
20 piastre pronte da 90 mm con 21 ± 2 mL.
Descrizione e tecnica
Descrizione
Una concentrazione dell'inibitore di 0,3-0,5 g/L non sembra influire sulla vitalità delle specie piogeniche, ma inibisce i batteri accompagnatori, sia Gram-positivi sia Gram-negativi. Sono inibite anche altre specie di Pseudomonas che possono svilupparsi a concentrazioni inibitorie più basse.
Anche se P. aeruginosa prevale su qualsiasi altro batterio esigente dopo un'incubazione di 48 ore a 30-35 °C, si raccomanda un'incubazione iniziale a 42 °C per 48 ore seguita da un'incubazione a 35 °C per 48 ore. Con questo metodo si ottiene un'inibizione quasi completa degli altri microrganismi.
Tecnica
Raccogliere, diluire e preparare campioni e volumi secondo le specifiche, le direttive, le norme ufficiali e/o i risultati attesi.
Una volta solidificato su una superficie piana, seminare le piastre per striscio o con il metodo a spirale.
Incubare le piastre non capovolte, in aerobiosi, a 30-35 °C per 18-72 h.
(A seconda del campione, delle specifiche, ecc., possono essere necessari tempi di incubazione più lunghi di quelli indicati sopra o temperature di incubazione diverse.)
Dopo l'incubazione, contare tutte le colonie comparse sulla superficie dell'agar con un colore blu-verdastro (dovuto alla produzione di pigmento da parte di Pseudomonas sp.).
Ogni laboratorio deve valutare i risultati secondo le proprie specifiche.
L'isolamento presuntivo di Pseudomonas sp. va confermato con ulteriori prove microbiologiche o biochimiche.
Presentazione
| Presentazione | 20 piastre pronte da 90 mm |
|---|---|
| Riempimento | 21 ± 2 mL |
| Confezione | 1 scatola con 2 confezioni da 10 piastre. Film singolo in BOPP. Ogni confezione porta un indicatore di irraggiamento attaccato sul lato della busta (8-14 kGy), con essiccante. Etichettatura laterale. |
Composizione
| Componente | g/L |
|---|---|
| Peptone di gelatina | 20,00 |
| Cloruro di magnesio | 1,40 |
| Solfato di potassio | 10,00 |
| Cetrimide | 0,30 |
| Agar | 13,60 |
| Glicerolo | 10,00 mL |
Controllo qualità
Controllo fisico-chimico
| Colore | Bianco sporco / opalescente |
|---|---|
| pH | 7,2 ± 0,2 a 25 °C |
Controllo microbiologico
Inoculare con 10-100 UFC secondo le farmacopee armonizzate o con 100-1000 UFC per la selettività.
Metodologia analitica secondo ISO 11133:2014/Amd 1:2018; A2:2020.
Aerobiosi. Incubazione a 30-35 °C. Lettura a 18-72 h.
| Microrganismo | Crescita |
|---|---|
| Escherichia coliATCC 8739, WDCM 00012 | Inibito |
| Ps. aeruginosaATCC 9027, WDCM 00026 | Buona (≥ 50 %) - colonie da verde-giallastre a verde scuro |
| Ps. aeruginosaATCC 27853, WDCM 00025 | Buona (≥ 50 %) - colonie da verde-giallastre a verde scuro |
| Ps. aeruginosaATCC 10145 | Buona (≥ 50 %) - colonie da verde-giallastre a verde scuro |
| Ps. aeruginosa (paraeruginosa)ATCC 9027, WDCM 00026 | Buona (≥ 50 %) - colonie da verde-giallastre a verde scuro |
Controllo di sterilità
Incubazione 48 h a 30-35 °C e 48 h a 20-25 °C: NESSUNA CRESCITA.
Controllo a 7 giorni dopo l'incubazione nelle stesse condizioni.
Bibliografia
- ATLAS, R.M. and L.C. PARKS (1993) Handbook of Microbiological Media. CRC Press Inc. Boca Raton, Fla.
- BROWN, V.I. & J.L. LOWBURY (1965) Use of an improved Cetrimide Agar Medium and of culture methods for Pseudomonas aeruginosa. J. Clin. Path. 18.752.
- COLIPA (1997) Guidelines on Microbial Quality Management (MQM). Brussels.
- EUROPEAN PHARMACOPOEIA 8.0 (2014) 8th ed. § 2.6.13. Microbiological examination of non-sterile products: Test for specified microorganisms. Harmonised Method. EDQM. Council of Europe. Strasbourg.
- FDA (Food and Drug Administration) (1998) Bacteriological Analytical Manual. 8th ed. Rev. A. AOAC International. Gaithersburg. VA.
- ISO 11133:2014/Amd 1:2018. Microbiology of food, animal feed and water. Preparation, production, storage and performance testing of culture media.
- ISO 22717 Standard (2015) Cosmetics - Microbiology - Detection of Pseudomonas aeruginosa.
- LOWBURY, E.J.L. & A.G. COLLINS (1955) The use of a new cetrimide product in a selective medium for Pseudomonas aeruginosa. J. Clin. Path. 8.47.
- USP 33 - NF 28 (2011) <62> Microbiological examination of non-sterile products: Test for specified microorganisms. Harmonised Method. USP Corp. Inc. Rockville. MD. USA.
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