Terreni pronti all'uso
XLD Agar EP/USP
Terreno solido per l'isolamento delle specie enteropatogene, in particolare Salmonella e Shigella, secondo il metodo armonizzato delle farmacopee e la norma ISO.
- Codice
- LC-794
- Categoria
- Terreni pronti all'uso
- Formato
- 20 piastre da 90 mm
- Conservazione
- da 15 a 25 °C
- Validità minima garantita
- 1 mese
- Norme
- Farmacopea Europea
Xylose Lysine Deoxycholate Agar è un terreno selettivo e differenziale, adatto alla rilevazione degli enterobatteri patogeni, in particolare Shigella. Il microbiota Gram-positivo è inibito dalla bassa quantità di desossicolato, mentre Shigella cresce.
Caratteristiche principali
Applicazioni
Isolamento selettivo di Salmonella e Shigella.
Settori
Clinico, controllo qualità del prodotto finito, alimenti, farmaceutico e veterinario.
Norme
Farmacopea Europea.
Presentazione
20 piastre pronte da 90 mm con 21 ± 2 mL.
Descrizione e tecnica
La fermentazione dello xilosio, del lattosio o del saccarosio produce l'acidificazione del terreno, che si vede dal viraggio al giallo dell'indicatore intorno alle colonie. Questo colore scompare dopo 24 ore, quindi le osservazioni vanno fatte tra 18 e 24 ore.
La produzione di idrogeno solforato dal tiosolfato si rileva facilmente, perché le colonie diventano più scure per il precipitato di solfuro ferrico. Nel terreno si può osservare anche la decarbossilazione della lisina a cadaverina, perché produce un'alcalinizzazione e di conseguenza l'indicatore vira al rosso.
Tutte queste reazioni permettono una buona differenziazione di Shigella. Edwardsiella e Proteus inconstans sono gli unici enterobatteri, oltre a Shigella, che non fermentano lo xilosio e quindi mostrano una reazione di fermentazione negativa. Salmonella fermenta lo xilosio, ma questo viene consumato rapidamente e l'alcalinizzazione del terreno dovuta alla decarbossilazione della lisina può mascherare la reazione. Le colonie di Salmonella diventano più scure per i precipitati di solfuro ferroso, una proprietà che hanno in comune con Edwardsiella.
Gli altri tipi di enterobatteri non subiscono questo fenomeno, perché l'accumulo di acido dovuto alla fermentazione del lattosio e del saccarosio è così alto da impedire, nelle prime 24 ore, il ritorno del pH per decarbossilazione e anche il precipitato di solfuro ferroso.
Nel controllo qualità sono descritti gli aspetti tipici delle colonie sul terreno XLD dopo 18-48 ore di incubazione a 30-35 °C.
Presentazione
| Presentazione | 20 piastre pronte da 90 mm |
|---|---|
| Riempimento | 21 ± 2 mL |
| Confezione | 1 scatola con 2 confezioni da 10 piastre. Film singolo in BOPP. Con essiccante. Etichettatura laterale. |
Composizione
| Componente | g/L |
|---|---|
| Xilosio | 3,50 |
| L-lisina cloridrato | 5,00 |
| Lattosio | 7,50 |
| Saccarosio | 7,50 |
| Cloruro di sodio | 5,00 |
| Estratto di lievito | 3,00 |
| Rosso fenolo | 0,08 |
| Desossicolato di sodio | 2,50 |
| Tiosolfato di sodio | 6,80 |
| Citrato ferrico ammonico | 0,80 |
| Agar | 13,5 |
Controllo qualità
Controllo fisico-chimico
| Colore | Rosso |
|---|---|
| pH | 7,4 ± 0,2 a 25 °C |
Controllo microbiologico
Secondo la USP e la Farmacopea Europea.
Inoculare con 10-100 UFC secondo le farmacopee armonizzate o con 100-1000 UFC per la selettività.
Metodologia analitica secondo ISO 11133:2014/Amd 1:2018; A2:2020.
Aerobiosi. Incubazione a 30-35 °C. Lettura a 18-24/48 h.
| Microrganismo | Crescita |
|---|---|
| Salmonella typhimuriumATCC 14028, WDCM 00031 | Buona - terreno di coltura e colonie rossi, centro nero (H₂S +) |
| Salmonella abonyNCTC 6017 | Buona - terreno di coltura e colonie rossi, centro nero (H₂S +) |
| Staphylococcus aureusATCC 6538, WDCM 00032 | Inibito |
Controllo di sterilità
Incubazione 48 h a 30-35 °C e 48 h a 20-25 °C: NESSUNA CRESCITA.
Controllo a 7 giorni dopo l'incubazione nelle stesse condizioni.
Bibliografia
- ATLAS, R.M., L.C. PARK (1993) Handbook of Microbiological Media for the examination of Food. CRC Press Inc. Boca Raton.
- DOWNES, F.P. & K. ITO (2001) Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods. 4th ed. APHA. Washington DC. USA.
- EUROPEAN PHARMACOPOEIA 11.0 (2023) 11th ed. § 2.6.13. Microbiological examination of non-sterile products: Test for specified microorganisms. Harmonised Method. EDQM. Council of Europe. Strasbourg.
- HORWITZ, W. (2000). Official Methods of Analysis of the AOAC International. 17th ed. Gaithersburg Md. USA.
- ICMSF (1978) Microorganisms in Foods 1. University of Toronto Press.
- PASCUAL ANDERSON, Mª R. (1992) Microbiología Alimentaria. Díaz de Santos, S.A. Madrid.
- TAYLOR, W.J. (1965) Isolation of Shigella. I. Xylose Lysine Agars: New media for isolation of enteric pathogens. Am. J. Clin. Path 44:471-475.
- US FDA (Food and Drug Administration). (1998) Bacteriological Analytical Manual. 8th ed. Rev. A. AOAC International. Gaithersburg, Md. USA.
- USP 33 - NF 28 (2011) <62> Microbiological examination of non-sterile products: Test for specified microorganisms. Harmonised Method. USP Corp. Inc. Rockville. MD. USA.
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