Terreni per biologia molecolare
LB Agar with Kanamycin 50µg/ml (Lennox)
Per selezionare colonie di Escherichia coli negli studi di genetica molecolare.
- Codice
- LC-2090
- Categoria
- Terreni per biologia molecolare
- Formato
- 500 g
- Conservazione
- da 2 a 25 °C
- Validità minima garantita
- 12 mesi
LB Agar with Kanamycin 50 µg/mL (Lennox) è usato per la crescita selettiva dei ceppi ricombinanti di E. coli resistenti alla kanamicina negli studi di genetica molecolare. Questo terreno è raccomandato per i ceppi che richiedono una concentrazione di sale più bassa.
Caratteristiche principali
Applicazioni
Selezione dei trasformanti di Escherichia coli.
Settori
Terreni di coltura per biologia molecolare.
Preparazione
35 g in un litro di acqua distillata; far bollire per un minuto, sterilizzare in autoclave a 118 °C per 10 minuti.
Principio e uso
Gli E. coli trasformati vengono seminati direttamente su terreni agarizzati selettivi (LB Agar contenente l'antibiotico), dove compariranno meno colonie trasformate per mL seminato. Per selezionare i batteri con il plasmide, è necessario trapiantare un inoculo da LB Agar a un LB Broth con l'antibiotico aggiunto.
Specifiche tecniche
| Solubilità | Senza residui |
|---|---|
| Aspetto | Polvere fine |
| Colore del terreno disidratato | Beige |
| Colore del terreno preparato | Ambra, leggermente opalescente |
| pH finale (25 °C) | 7,0 ± 0,2 |
| Quantità per litro | 35 g |
| Conservazione | da 2 a 25 °C |
Formula
| Componente | g/L |
|---|---|
| Agar batteriologico | 15 |
| Kanamicina | 0,05 |
| Cloruro di sodio | 5 |
| Triptone | 10 |
| Estratto di lievito | 5 |
Preparazione e uso
Preparazione
Sospendere 35 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Sterilizzare in autoclave a 118 °C per 10 minuti. Raffreddare a 45-50 °C, mescolare bene e distribuire in piastre.
Istruzioni per l'uso
- Eseguire la procedura sperimentale secondo l'uso o lo scopo appropriato.
- Inoculare e incubare a una temperatura di 35 ± 2 °C per 18-24 ore.
Controllo qualità
Prova microbiologica
Condizioni di incubazione: 35 ± 2 °C / 18-24 h.
| Microrganismo | Specifica |
|---|---|
| Escherichia coli DH5 alpha + pHSG298 | Crescita buona |
| Escherichia coliATCC 25922 | Inibizione totale |
| Escherichia coliATCC 8739 | Inibizione totale |
Bibliografia
- Atlas, R.M., L.C. Parks (1993) Handbook of Microbiological Media. CRC Press, Inc. London.
- The condensed protocols from molecular cloning: a laboratory manual / Joseph Sambrook, David W. Russell.
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