Terreni per biologia molecolare
LB Agar (Lennox) with Ampicilin 100 µg/ml
Per la coltivazione di E. coli negli studi di genetica molecolare.
- Codice
- LC-2084
- Categoria
- Terreni per biologia molecolare
- Formato
- 500 g
- Conservazione
- da 2 a 8 °C
- Validità minima garantita
- 12 mesi
Il terreno LB Agar (Lennox) with Ampicillin 100 µg/mL è usato per la crescita selettiva dei ceppi ricombinanti di E. coli resistenti all'ampicillina negli studi di genetica molecolare. Questo terreno è raccomandato per i ceppi che richiedono una concentrazione di sale più bassa.
Caratteristiche principali
Applicazioni
Selezione dei trasformanti di Escherichia coli.
Settori
Terreni di coltura per biologia molecolare.
Preparazione
35 g in un litro di acqua distillata; far bollire per un minuto, evitare di surriscaldare, non sterilizzare in autoclave.
Principio e uso
Gli E. coli trasformati vengono seminati direttamente su terreni agarizzati selettivi (LB Agar contenente l'antibiotico), dove compariranno meno colonie trasformate per mL seminato. Per selezionare i batteri con il plasmide, è necessario trapiantare un inoculo da LB Agar a un LB Broth con l'antibiotico aggiunto.
Specifiche tecniche
| Solubilità | Senza residui |
|---|---|
| Aspetto | Polvere fine |
| Colore del terreno disidratato | Beige |
| Colore del terreno preparato | Ambra, leggermente opalescente |
| pH finale (25 °C) | 7,0 ± 0,2 |
| Quantità per litro | 35 g |
| Conservazione | da 2 a 8 °C |
Formula
| Componente | g/L |
|---|---|
| Ampicillina | 0,1 |
| Agar batteriologico | 15 |
| Cloruro di sodio | 5 |
| Triptone | 10 |
| Estratto di lievito | 5 |
Formula tipica in g/L, adattata e/o integrata secondo necessità per soddisfare i criteri di prestazione.
Preparazione e uso
Preparazione
Sospendere 35 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. EVITARE DI SURRISCALDARE. NON STERILIZZARE IN AUTOCLAVE. Raffreddare a 45-50 °C, mescolare bene e distribuire in piastre.
Istruzioni per l'uso
Inoculare e incubare a una temperatura di 35 ± 2 °C per 18-24 ore.
Controllo qualità
Prova microbiologica
Condizioni di incubazione: 35 ± 2 °C / 18-24 h.
| Microrganismo | Specifica |
|---|---|
| Escherichia coli DH5 alpha + pUC19 | Crescita buona |
| Escherichia coliATCC 25922 | Inibizione totale |
| Escherichia coliATCC 8739 | Inibizione totale |
Bibliografia
- Atlas, R.M., L.C. Parks (1993) Handbook of Microbiological Media. CRC Press, Inc. London.
- The condensed protocols from molecular cloning: a laboratory manual / Joseph Sambrook, David W. Russell.
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