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Terreni per biologia molecolare

Luria Agar with Kanamycin 50µg/ml (Miller`s LB agar)

Per selezionare colonie di Escherichia coli in genetica molecolare.

Codice
LC-2091
Formato
500 g
Conservazione
da 2 a 25 °C
Validità minima garantita
12 mesi

Luria Agar with Kanamycin 50 µg/mL (Miller’s LB Agar) è usato per la crescita selettiva dei ceppi ricombinanti di E. coli resistenti alla kanamicina negli studi di genetica molecolare. Questo terreno è raccomandato per i ceppi che richiedono una concentrazione di sale più bassa.

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CodiceFormatoPrezzo
LC-2091500 g

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Caratteristiche principali

Applicazioni

Selezione dei trasformanti di Escherichia coli.

Settori

Terreni di coltura per biologia molecolare.

Preparazione

40 g in un litro di acqua distillata; far bollire per un minuto, non surriscaldare, non sterilizzare in autoclave.

Principio e uso

Gli E. coli trasformati vengono seminati direttamente su terreni agarizzati selettivi (LB Agar contenente l'antibiotico), dove compariranno meno colonie trasformate per mL seminato. Per selezionare i batteri con il plasmide, è necessario trapiantare un inoculo da LB Agar a un LB Broth con l'antibiotico aggiunto.

Specifiche tecniche

SolubilitàSenza residui
AspettoPolvere fine
Colore del terreno disidratatoBeige
Colore del terreno preparatoAmbra, leggermente opalescente
pH finale (25 °C)7,0 ± 0,2
Quantità per litro40 g

Formula

Componenteg/L
Agar batteriologico15
Kanamicina0,05
Cloruro di sodio10
Triptone10
Estratto di lievito5

Formula tipica in g/L, adattata e/o integrata secondo necessità per soddisfare i criteri di prestazione.

Preparazione e uso

Preparazione

Sospendere 40 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. NON SURRISCALDARE. NON STERILIZZARE IN AUTOCLAVE. Raffreddare a 45-50 °C, mescolare bene e distribuire in piastre.

Istruzioni per l'uso

  1. Eseguire la procedura sperimentale secondo l'uso o lo scopo appropriato.
  2. Inoculare e incubare a 35 ± 2 °C per 18-24 ore.

Controllo qualità

Prova microbiologica

Condizioni di incubazione: 35 ± 2 °C / 18-24 h.

Condizioni di inoculo: produttività quantitativa (100 ± 20 UFC, minimo 50 UFC) / selettività (10⁴-10⁶ UFC).

Terreno di riferimento: TSA.

MicrorganismoSpecifica
Escherichia coli DH5 alpha + pHSG298Crescita buona, > 50 %
Escherichia coliATCC 25922Inibizione totale
Escherichia coliATCC 8739Inibizione totale

Bibliografia

  • Atlas, R.M., L.C. Parks (1993) Handbook of Microbiological Media. CRC Press, Inc. London.
  • The condensed protocols from molecular cloning: a laboratory manual / Joseph Sambrook, David W. Russell.

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