Terreni pronti all'uso
Sbouraud Dextrose Agar with Chloramphenicol EP/USP/ISO
Terreno per la conta e la coltivazione dei funghi (muffe e lieviti).
- Codice
- LC-5072
- Categoria
- Terreni pronti all'uso
- Formato
- 10 flaconi da 200 mL
- Conservazione
- da 8 a 25 °C
- Validità minima garantita
- 4 mesi
- Norme
- Farmacopea EuropeaISO 16212USP
Questo terreno di coltura si differenzia dal classico Sabouraud Agar solo per l'aggiunta di cloramfenicolo. Questo antibiotico termostabile ha un ampio spettro antibatterico, che assicura l'isolamento selettivo dei funghi da campioni molto contaminati.
Caratteristiche principali
Applicazioni
Conta selettiva di lieviti e muffe.
Settori
Alimenti, coltivazione generale, farmaceutico e veterinario.
Norme
Farmacopea Europea, ISO 16212, USP.
Presentazione
10 flaconi pronti da 250 mL con 200 ± 5 mL.
Descrizione e tecnica
Tecnica
Per l'uso, il contenuto del flacone va versato in piastre. Il terreno di coltura va fuso secondo le istruzioni del produttore, a bagnomaria o nel forno a microonde. Non applicare mai calore diretto per fondere un terreno. Le temperature e i tempi di fusione dipendono dalla forma del contenitore, dal volume di terreno e dalla fonte di calore. Prima di fondere qualsiasi terreno, allentare il tappo a vite del contenitore per evitare che si rompa. Il terreno va fuso una sola volta e poi usato. I terreni con agar non vanno fusi più volte, perché le loro caratteristiche cambiano a ogni nuova fusione. Il surriscaldamento va evitato quanto il riscaldamento prolungato, soprattutto per i terreni a pH acido o alcalino. Una volta fuso il terreno, versare le piastre con tecniche asettiche.
L'inoculo si esegue per striscio o con il metodo a spirale.
Incubare le piastre non capovolte, in aerobiosi, a 20-25 °C fino a 5 giorni.
(A seconda del campione o delle specifiche possono essere necessari tempi di incubazione più lunghi di quelli indicati sopra o temperature di incubazione diverse.)
Dopo l'incubazione, contare tutte le colonie comparse sulla superficie dell'agar.
Ogni laboratorio deve valutare i risultati secondo le proprie specifiche.
Presentazione
| Presentazione | 10 flaconi pronti da 250 mL |
|---|---|
| Riempimento | 200 ± 5 mL |
| Confezione | 1 scatola con 10 flaconi da 250 mL. Tappo non perforabile. |
Composizione
| Componente | g/L |
|---|---|
| D(+) glucosio | 40,0 |
| Peptone di caseina | 5,00 |
| Peptone di carne | 5,00 |
| Agar | 15,0 |
| Cloramfenicolo | 0,05 |
Controllo qualità
Controllo fisico-chimico
| Colore | Giallo paglierino |
|---|---|
| pH | 5,6 ± 0,2 a 25 °C |
Controllo microbiologico
Fusione - piastre per inclusione - inoculo: intervallo pratico 100 ± 20 UFC, minimo 50 UFC (produttività) / 10⁴-10⁶ UFC (selettività).
Prova di promozione della crescita secondo le monografie e i metodi di prova armonizzati delle farmacopee e ISO 11133:2014.
Aerobiosi. Incubazione a 22,5 ± 2,5 °C. Lettura a 24-72 h per i batteri e a 3-5 giorni per lieviti e muffe.
| Microrganismo | Crescita |
|---|---|
| Aspergillus brasiliensisATCC 16404, WDCM 00053 | Buona (≥ 50 %) |
| Candida albicansATCC 10231, WDCM 00054 | Buona (≥ 50 %) |
| S. cerevisiaeATCC 9763, WDCM 00058 | Buona (≥ 50 %) |
| Escherichia coliATCC 8739, WDCM 00012 | Inibito |
| Bacillus subtilisATCC 6633, WDCM 00003 | Inibito |
Controllo di sterilità
Incubazione 48 ore a 30-35 °C e 48 ore a 20-25 °C: NESSUNA CRESCITA.
Controllo a 7 giorni dopo l'incubazione nelle stesse condizioni.
Bibliografia
- AJELLO, L. (1957) Cultural Methods for Human Pathogenic Fungi. J. Chron. Dis. 5:545-551.
- COLIPA (1997) Guidelines on Microbial Quality Management (MQM). Brussels.
- EUROPEAN PHARMACOPOEIA 8.0 (2014) 8th ed. § 2.6.13. Microbiological examination of non-sterile products: Test for specified microorganisms. Harmonised Method. EDQM. Council of Europe. Strasbourg.
- GEORGE, L.K., AJELLO, L. & PAPAGEORGE, C. (1954) Use of Cycloheximide in the Selective Isolation of Fungi Pathogenic to Man. J. Lab. Clin. Med, 44 (422-428).
- HANTSCHKE, D. (1968) Mykosen, 11, (769-778).
- ISO 11133:2014/Amd 1:2018. Microbiology of food, animal feed and water. Preparation, production, storage and performance testing of culture media.
- ISO 13681 Standard. (1995). Enumeration of Yeasts and Moulds. Colony Count Technique.
- PAGANO, J. LEVIN, J.D. and TREJO, W. (1957-58) Diagnostic Medium for Differentiation of Species of Candida. Antibiotics Annual, 137-143.
- SABOURAUD, R. (1910) Les Teignes. Masson, Paris.
- USP 33 - NF 28 (2011) <62> Microbiological examination of non-sterile products: Test for specified microorganisms. Harmonised Method. USP Corp. Inc. Rockville. MD. USA.
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