Terreni disidratati
Schubert Broth
Terreno di conferma dei coliformi, in particolare di E. coli.
- Codice
- LC-1282
- Categoria
- Terreni disidratati
- Formato
- 500 g
- Conservazione
- da 2 a 25 °C
- Validità minima garantita
- 15 mesi
Schubert Broth si usa per confermare la presenza di coliformi e di Escherichia coli. Le prove biochimiche si eseguono nella stessa provetta: fermentazione del mannitolo e produzione di indolo, con un risparmio di tempo, di manipolazioni e di spazio. Le provette con torbidità associata alla produzione di gas si considerano positive.
Caratteristiche principali
Applicazioni
Rilevazione di Escherichia coli.
Settori
Alimenti.
Preparazione
31,5 g in un litro di acqua distillata; far bollire per un minuto, sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.
Principio e uso
La produzione di indolo si può evidenziare aggiungendo una o due gocce di Kovac's Reagent. Il Kovac's Reagent rileva i microrganismi capaci di scindere il triptofano. Quando questi microrganismi sono presenti nel terreno liberano indolo, che reagisce con la 4-dimetilamminobenzaldeide formando un colorante rosso scuro.
Il peptone e il triptone forniscono azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. Il mannitolo è il carboidrato fermentabile che fornisce carbonio ed energia. Il cloruro di sodio fornisce gli elettroliti essenziali per il trasporto e l'equilibrio osmotico. Il solfato di magnesio e il solfato di ammonio sono ioni necessari in una grande varietà di reazioni enzimatiche, compresa la replicazione del DNA. Il citrato di sodio inibisce parzialmente o completamente gli organismi Gram-positivi, i coliformi e Proteus. L'aggiunta di triptofano al terreno permette di eseguire la prova dell'indolo, per un'ulteriore conferma di E. coli.
Specifiche tecniche
| Solubilità | Senza residui |
|---|---|
| Aspetto | Polvere fine |
| Colore del terreno disidratato | Beige |
| Colore del terreno preparato | Ambra, leggermente opalescente |
| pH finale (25 °C) | 7,6 ± 0,2 |
| Quantità per litro | 31,5 g |
| Conservazione | da 2 a 25 °C |
Formula
| Componente | g/L |
|---|---|
| Solfato di ammonio | 0,4 |
| Acido L-glutammico | 0,2 |
| Solfato di magnesio | 0,7 |
| Mannitolo | 7,5 |
| Peptone | 10 |
| Cloruro di sodio | 2 |
| Citrato di sodio | 0,5 |
| Triptone | 10 |
| Triptofano | 0,2 |
Preparazione e uso
Preparazione
Sospendere 31,5 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Distribuire in contenitori adatti e sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.
Istruzioni per l'uso
- Inoculare una colonia isolata nella provetta di Schubert Broth.
- Incubare alla temperatura di 44 °C per 24 ore.
- Per la prova dell'indolo, aggiungere da 3 a 4 gocce di Kovac's Reagent (LC-5205) e agitare delicatamente la provetta.
- La comparsa di un colore rosso o rosa nello strato del reattivo è un'indicazione positiva di indolo.
Controllo qualità
Prova microbiologica
Condizioni di incubazione: 44 °C / 24 h.
| Microrganismo | Specifica | Reazione caratteristica |
|---|---|---|
| Escherichia coliATCC 25922 | Crescita buona | Indolo (+) |
| Staphylococcus aureusATCC 25923 | Crescita inibita | |
| Enterococcus faecalisATCC 29212 | Crescita inibita | |
| Escherichia coliATCC 8739 | Crescita buona | Indolo (+) |
Bibliografia
- Mackenzie E.F.N., Taylor E.N. and Gilbert W.E. 1948. Recent experiences in the rapid identification of E. coli, type I. J. Gen. Microbiol. 2:197-204.
- Fennel H. 1972. A single tube confirmatory test for E. coli at 44 °C. Proc. Soc. Wat. Treatm. Exam. 21:13-20.
- Oger C. and Leclerc H. 1977. Essais de nouveaux tests "haute température" pour mise en évidence des coliformes fécaux ou des Escherichia coli dans les eaux. Microbia. 3:47.
- AFNOR. T90-413. Octobre 1985. Essais des eaux - Recherche et dénombrement des coliformes et des coliformes thermo-tolérants. Méthode générale par ensemencement en milieu liquide (NPP).
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