Tetrathionate MK Broth Base ISO

Descrizione

Durante la preparazione, quando si aggiunge lo iodio, dal solfato si forma il tetrationato; questo sale, insieme ai sali biliari del terreno, provoca una forte inibizione della maggior parte dei batteri intestinali normali, tranne quelli in grado di ridurre il tetrationato, per esempio le salmonelle. Le reazioni di riduzione liberano acido solforico, che viene neutralizzato dal carbonato, evitando un abbassamento del pH, dannoso anche per le salmonelle. Tuttavia molte specie di Proteus resistono alla concentrazione di sali biliari e possono ridurre il tetrationato. Per questo molti autori raccomandano di aggiungere contemporaneamente altri inibitori, come la soluzione di verde brillante allo 0,1 % (10 mL/L) e/o la novobiocina a 40 mg/L.

Tecnica

Nota: il precipitato bianco è dovuto al carbonato di calcio e non altera le prestazioni del brodo.

Raccogliere, diluire e preparare campioni e volumi secondo le specifiche, le direttive, le norme ufficiali e/o i risultati attesi.

Subito prima dell'inoculo di Müller Kauffmann Tetrathionate Novobiocin Broth, formulato secondo ISO 6579:2017, integrare le provette/i flaconi per ottenere le seguenti concentrazioni di soluzione di iodio/ioduro:

• 2 mL di soluzione di iodio-ioduro per ogni 100 mL di terreno base in flaconi;
• 0,2 mL di iodio-ioduro per ogni 10 mL di terreno base in provette.

Inoculare in modo asettico le provette/i flaconi con il campione preparato o con la sua diluizione e incubare le provette ben chiuse, in aerobiosi, a 37 ± 1 °C per 24 ± 3 h. Eliminare le provette integrate se non vengono usate entro 10 ore.

Dopo l'incubazione di arricchimento, inoculare un qualsiasi terreno secondario di conferma per striscio o con il metodo a spirale, come XLD. Contare tutte le colonie comparse sulla superficie dell'agar. L'isolamento o il recupero presuntivo di Salmonella va confermato con ulteriori prove microbiologiche e biochimiche.

Ogni laboratorio deve valutare i risultati secondo le proprie specifiche.

Controllo fisico-chimico

Controllo microbiologico

Aggiungere il supplemento per la prova di funzionalità - inoculo: intervallo pratico 100 ± 20 UFC, minimo 50 UFC (produttività) / 10⁴-10⁶ (selettività).

Aggiungere 20 mL/L di soluzione di iodio-ioduro.

Aerobiosi. Incubazione a 37 ± 1 °C, lettura dopo 24 ± 3 h.

Controllo microbiologico secondo ISO 11133:2014.

Controllo di sterilità

Incubazione 48 ore a 30-35 °C e 48 ore a 20-25 °C: NESSUNA CRESCITA.

Controllo a 7 giorni dopo l'incubazione nelle stesse condizioni.

• DIN Standard 10160 Untersuchung von Fleisch und Fleischerzeugnissen: Nachweis von Salmonellen. Referenzverfahren.
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