Terreni disidratati
Trypticasein Soy Agar (TSA) No.2
Per l'isolamento, la coltivazione e la rilevazione dell'attività emolitica dei microrganismi esigenti.
- Codice
- LC-1561
- Categoria
- Terreni disidratati
- Formato
- 500 g
- Conservazione
- da 2 a 25 °C
- Validità minima garantita
- 15 mesi
Trypticasein Soy Agar (TSA) No. 2 è una formulazione migliorata dell'originale TSA Agar, da usare con supplementi di sangue animale, con il 5 o il 10 % di sangue di montone. Si usa per l'isolamento, la coltivazione e la rilevazione delle reazioni emolitiche dei microrganismi esigenti. Queste reazioni emolitiche sono importanti per differenziare i batteri dei campioni, soprattutto le specie di Streptococcus.
Caratteristiche principali
Rilevazione e isolamento selettivo di Streptococcus.
Coltivazione generale.
40 g in un litro di acqua distillata; far bollire per un minuto, sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti, aggiungere il 5-10 % di sangue defibrinato sterile.
Principio e uso
Trypticasein Soy Agar No. 2, integrato con il 5 % di sangue di montone, offre reazioni emolitiche chiare e visibili con gli streptococchi di gruppo A (Streptococcus pyogenes).
Il triptone H aumenta la produzione di emolisina. Il cloruro di sodio fornisce gli elettroliti essenziali per il trasporto e l'equilibrio osmotico. Il peptone di soia fornisce azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. L'agar batteriologico è l'agente solidificante. Il sangue è una fonte aggiuntiva che fornisce fattori di crescita ai microrganismi ed è la base per determinare le reazioni emolitiche.
Gli streptococchi emolitici si presentano come colonie traslucide od opache, grigiastre, piccole (1 mm), oppure grandi, opache e mucose (2-4 mm), circondate da una zona di emolisi. Gli stafilococchi si presentano come colonie opache, da bianche a giallo oro, con o senza zone di beta emolisi.
Specifiche tecniche
| Solubilità | Senza residui |
|---|---|
| Aspetto | Polvere fine |
| Colore del terreno disidratato | Beige |
| Colore del terreno preparato | Ambra, leggermente opalescente |
| pH finale (25 °C) | 7,3 ± 0,2 |
| Quantità per litro | 40 g |
| Conservazione | da 2 a 25 °C |
Formula
| Componente | g/L |
|---|---|
| Agar batteriologico | 15 |
| Cloruro di sodio | 5 |
| Peptone di soia | 5 |
| Triptone H | 15 |
Formula tipica in g/L, adattata e/o integrata secondo necessità per soddisfare i criteri di prestazione.
Preparazione e uso
Preparazione
Sospendere 40 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso, e far bollire per un minuto. Sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti. Raffreddare a 45-50 °C e aggiungere il 5-10 % di sangue defibrinato sterile, omogeneizzare e versare in piastre di Petri. Fare attenzione a evitare la formazione di bolle quando si aggiunge il sangue al terreno raffreddato, e ruotare lentamente la beuta o il flacone per ottenere una soluzione omogenea.
Istruzioni per l'uso
Inoculare e incubare le piastre a una temperatura di 35 ± 2 °C in atmosfera con il 5-10 % di CO₂ e osservare dopo 18-24 ore.
Controllo qualità
Condizioni di incubazione: 35 ± 2 °C / 18-24 h.
| Microrganismo | Specifica | Reazione caratteristica |
|---|---|---|
| Staphylococcus epidermidisATCC 12228 | Crescita buona | Nessuna emolisi |
| Neisseria meningitidisATCC 13090 | Crescita buona | Nessuna emolisi |
| Streptococcus pyogenesATCC 19615 | Crescita buona | Beta emolisi |
| Staphylococcus aureusATCC 25923 | Crescita buona | Beta emolisi |
| Streptococcus pneumoniaeATCC 6305 | Crescita buona | Alpha emolisi |
Bibliografia
- U.S. Food and Drug Administration. 1995. Bacteriological analytical manual, 8th ed. AOAC International, Gaithersburg, Md.
- Downes and Ito (ed.). 2001. Compendium of methods for the microbiological examination of foods, 4th ed. American Public Health Association, Washington, D.C.
- Ruoff, Whiley and Beighton. 1999. In Murray, Baron, Pfaller, Tenover and Yolken (ed.), Manual of clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C.
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