ESTY Medium

Questo terreno è raccomandato per l'isolamento e la conta di Streptococcus thermophilus nello yogurt. Gli streptococchi lattici producono acido e sono difficili da coltivare. Sono esigenti dal punto di vista nutrizionale e richiedono terreni di coltura complessi per una crescita ottimale. Il glicerofosfato, presente in alte concentrazioni, agisce da regolatore del pH e inibisce lo sviluppo di Lactobacillus bulgaricus, mentre l'acido ascorbico favorisce la crescita degli streptococchi lattici. È raccomandato per il mantenimento delle colture starter, in cui questi microrganismi producono acidi nel loro metabolismo.

L'estratto di manzo, il triptone e il peptone di soia forniscono azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. L'estratto di lievito è fonte di vitamine, in particolare del gruppo B. Il glicerofosfato disodico è un agente tampone. L'acido ascorbico favorisce la crescita degli streptococchi lattici. Il solfato di magnesio fornisce ioni necessari in un'ampia varietà di reazioni enzimatiche, compresa la replicazione del DNA, e agisce anche da tampone. L'agar batteriologico è l'agente solidificante.

Preparazione

Sospendere 48,25 grammi di terreno in 950 mL di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti. Raffreddare a 45-50 °C e aggiungere in asepsi 5 grammi di lattosio, ricostituito in precedenza in 50 mL di acqua distillata. Sterilizzare la soluzione di lattosio per filtrazione su membrana. Omogeneizzare delicatamente e distribuire in piastre di Petri.

Istruzioni per l'uso

Metodo per striscio:

1. In una piastra di Petri, aggiungere 12-15 mL di agar fuso e lasciar solidificare.
2. Inoculare 10 µL della sospensione iniziale e/o del campione diluito.
3. Distribuire l'inoculo sulla superficie dell'agar con un'ansa sterile.
4. Incubare le piastre capovolte a una temperatura di 35 ± 2 °C per 24-48 ore.

• Terzaghi, B.E. and W.E. Sandine. 1975. Improved medium for lactic streptococci and their bacteriophages. Appl. Microbiol. 29:807-813.
• International Dairy Federation 1981. Identification and enumeration of micro-organisms in fermented milks. Joint IDF/ISO/AOAC.