Terreni disidratati
Trypticasein Soy Broth Modified with Novobiocin (mTSB) ISO
Per l'arricchimento di E. coli enteroemorragico negli alimenti.
- Codice
- LC-1292
- Categoria
- Terreni disidratati
- Formato
- 500 g
- Conservazione
- da 2 a 25 °C
- Validità minima garantita
- 15 mesi
- Norme
- ISO 16654
Trypticasein Soy Broth Modified with Novobiocin (mTSB) è raccomandato dalla norma ISO 16654 per l'arricchimento di E. coli O157:H7.
Caratteristiche principali
Applicazioni
Arricchimento selettivo di Escherichia coli O157.
Settori
Alimenti.
Norme
ISO 16654.
Preparazione
33 g in un litro di acqua distillata; far bollire per un minuto, sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.
Principio e uso
Il peptone di caseina e il peptone di soia forniscono azoto, vitamine, minerali e aminoacidi essenziali per la crescita. Il cloruro di sodio fornisce gli elettroliti essenziali per il trasporto e l'equilibrio osmotico. Il fosfato dipotassico agisce da sistema tampone. Il glucosio è il carboidrato fermentabile che fornisce carbonio ed energia. I sali biliari e la novobiocina sono inibitori degli organismi Gram-positivi.
La norma ISO 16654 raccomanda di preparare la sospensione iniziale e di aggiungere una porzione da analizzare al brodo preriscaldato a 41,5 °C, in modo da ottenere un rapporto tra porzione da analizzare e mTSB + campione di 1/10 (massa su volume o volume su volume). Incubare per 6 ore, poi per altre 12-18 ore a 41,5 °C.
Specifiche tecniche
| Solubilità | Senza residui |
|---|---|
| Aspetto | Polvere fine |
| Colore del terreno disidratato | Beige |
| Colore del terreno preparato | Ambra |
| pH finale (25 °C) | 7,4 ± 0,2 |
| Quantità per litro | 33 g |
| Conservazione | da 2 a 25 °C |
Formula
| Componente | g/L |
|---|---|
| Glucosio | 2,5 |
| Sali biliari n. 3 | 1,5 |
| Fosfato dipotassico | 4 |
| Novobiocina | 0,02 |
| Digerito pancreatico di caseina | 17 |
| Cloruro di sodio | 5 |
| Peptone di soia | 3 |
Preparazione e uso
Preparazione
Sospendere 33 grammi di terreno in un litro di acqua distillata. Mescolare bene e sciogliere scaldando e agitando spesso. Far bollire per un minuto fino a completa dissoluzione. Distribuire in provette e sterilizzare in autoclave a 121 °C per 15 minuti.
Secondo ISO 16654
Per la rilevazione di Escherichia coli O157 secondo ISO 16654:
- Preparare la sospensione iniziale aggiungendo la porzione da analizzare a Trypticasein Soy Broth Modified with Novobiocin preriscaldato a 41,5 °C, in modo da ottenere un rapporto di 1/10.
- Separare e concentrare i microrganismi con particelle immunogeniche rivestite di anticorpi contro E. coli O157.
- Incubare per 6 ore, poi per altre 12-18 ore a 41,5 °C.
- Trapiantare le particelle immunomagnetiche con i batteri adesi su MacConkey Agar with Sorbitol (LC-1099) e su un secondo agar di isolamento selettivo scelto dal laboratorio. La temperatura di incubazione ottimale per E. coli O157 è 37 ± 1 °C per 18-24 ore.
- Confermare con la produzione di indolo in Tryptophan Culture Broth (LC-1237) e con l'agglutinazione con il siero anti-E. coli O157.
Controllo qualità
Prova microbiologica
Condizioni di incubazione: 41,5 ± 1 °C / 6; 12-18 h.
Condizioni di inoculo: produttività qualitativa (< 100 UFC) / selettività (10⁴-10⁶ UFC).
| Microrganismo | Specifica |
|---|---|
| Escherichia coliATCC 25922 | Crescita buona |
| Escherichia coli O157:H7ATCC 43895 | Crescita buona |
| Staphylococcus aureusATCC 6538 | Inibizione totale |
Bibliografia
- ISO 16654:2001 Microbiology of food and animal feed stuffs. Horizontal method for the detection of E. coli O157.
- PHLS Standard Methods F17 & W16: Detection of E. coli O157.
- FDA/BAM 8th Edition (Rev. A) (1998) Chapter 4: 4.20-4.26.
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